Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-CPS1 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P31327

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CPS1

• CPS1, también conocida como Carbamoil-fosfato sintetasa I, es una enzima mitocondrial que cataliza el primer paso comprometido del ciclo de la urea, convirtiendo amoníaco en carbamoil fosfato, lo cual es esencial para la desintoxicación de amoníaco en animales ureotélicos.
• Desempeña un papel crítico en la eliminación del exceso de amoníaco de las células, principalmente en el hígado y el intestino delgado, donde se expresa altamente.
• La proteína se localiza en la matriz mitocondrial, pero también se ha detectado en el núcleo, el nucléolo y la membrana celular, lo que sugiere funciones adicionales no canónicas.
• CPS1 sufre varias modificaciones postraduccionales, incluyendo acetilación y fosforilación, y presenta empalme alternativo, lo que puede regular su actividad o localización.
• Como enzima alostérica que se une a ATP, pertenece a la familia de las ligasas y es un componente clave del ciclo de la urea, con mutaciones vinculadas a variantes de enfermedades.
• La proteína madura tiene un peso molecular de aproximadamente 165 kDa, consistente con su precursor de 164939 Da después del corte del péptido de tránsito mitocondrial.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Para Western blot, la detección del objetivo a ~165 kDa requiere una concentración de gel apropiada (por ejemplo, SDS-PAGE al 6-8%) y tiempos de transferencia prolongados debido al alto peso molecular.
• En protocolos de inmunofluorescencia (IF-P), se deben determinar las condiciones óptimas de fijación y permeabilización para preservar la estructura mitocondrial mientras se permite el acceso del anticuerpo.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), se debe validar el pH y el método de recuperación de antígeno; las secciones de tejido de hígado e intestino delgado sirven como controles positivos adecuados según la especificidad tisular.
• Dado que el inmunógeno es un péptido sintético de los residuos 100-200, la especificidad puede confirmarse mediante ensayos de competición con péptido o análisis Western blot utilizando lisados de células con knockout de CPS1, si están disponibles.

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