Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-CRACR2A para WB, IHC-P, ELISA - Q9BSW2

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CRACR2A

• CRACR2A, también conocido como proteína 4B que contiene el dominio de unión a calcio EF-hand (EFCAB4B) o proteína relacionada con Ras Rab-46 (RAB46), es una proteína de unión a calcio con actividad GTPasa que desempeña funciones duales en la entrada de calcio operada por depósitos (SOCE) y el tráfico intracelular. Referencias relacionadas: PMID:27016526
• En las células T, CRACR2A funciona como un sensor de calcio citoplasmático que facilita la agrupación de ORAI1 y STIM1 en las uniones de la membrana plasmática con el retículo endoplasmático, promoviendo la activación del canal CRAC. Tras la entrada de calcio, se disocia del complejo para regular la estabilidad del canal. Referencias relacionadas: PMID:27016526
• Como una GTPasa Rab, CRACR2A media el transporte retrógrado de los cuerpos de Weibel-Palade (WPB) hacia el centro organizador de microtúbulos (MTOC) en las células endoteliales en respuesta a la estimulación con histamina, actuando de manera independiente del calcio. Referencias relacionadas: PMID:31092558
• CRACR2A también funciona como una proteína adaptadora de dineína regulada por calcio, activando el transporte mediado por dineína y regulando el tráfico endosomal de CD47. Referencias relacionadas: PMID:30814157
• Puentea las vías de señalización del TCR al localizarse en la sinapsis inmunológica tras la activación de las células T, donde interactúa con VAV1 para activar las cascadas de señalización descendentes Ca2+-NFAT y JNK. Referencias relacionadas: PMID:27016526
• A nivel subcelular, CRACR2A se encuentra en el citoplasma, en la membrana plasmática, en el aparato de Golgi, en la red trans-Golgi y asociada con vesículas y el centro organizador de microtúbulos. Su localización cambia dependiendo del estado de activación y el tipo celular.
• La expresión tisular incluye líneas de células T como Jurkat y células endoteliales, con localización específica en los cuerpos de Weibel-Palade en las células endoteliales. Referencias relacionadas: PMID:25475730, PMID:31092558, PMID:27016526, PMID:30814157
• La proteína contiene dominios EF-hand para la unión de calcio, un dominio GTPasa y sufre prenilación (como se indica en las palabras clave), lo que sugiere una asociación con la membrana. Existen múltiples isoformas debido al empalme alternativo.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aminoácidos 1-200) del CRACR2A humano, lo que puede dirigirse a epítopos conservados entre isoformas. Considere verificar la detección específica de la isoforma en su sistema experimental.
• Para la transferencia Western (Western blotting), el peso molecular predicho es de aproximadamente 83 kDa. Al analizar CRACR2A endógeno, preste atención a posibles modificaciones postraduccionales o variantes de empalme que puedan alterar la migración.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), las condiciones de recuperación de antígenos deben optimizarse para el tejido específico y la unión del anticuerpo. Valide los patrones de tinción utilizando controles positivos (por ejemplo, tejidos ricos en células T) y negativos apropiados.
• El anticuerpo presenta reactividad cruzada con muestras de ratón según las especificaciones del proveedor, pero recomendamos validar la especificidad en tejidos o líneas celulares de ratón antes de su uso.
• Para aplicaciones de ELISA, considere el uso de un sistema de detección secundario compatible con anticuerpos policlonales de conejo; titre el anticuerpo para determinar la concentración de trabajo óptima.

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