Anticuerpo policlonal de conejo Anti-CRYAA para WB, IF-P, ELISA - P02489

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la cadena A de alfa-cristalina

• La cadena A de alfa-cristalina, también conocida como proteína de choque térmico beta-4 (HspB4), es una proteína estructural principal del cristalino ocular de los vertebrados, que contribuye a su transparencia e índice de refracción.
  Referencias relacionadas: PMID:18302245
• En su forma oxidada, actúa como una chaperona molecular, evitando la agregación de proteínas desnaturalizadas bajo diversas condiciones de estrés, una función fundamental para mantener la claridad del cristalino.
  Referencias relacionadas: PMID:18199971, PMID:19595763, PMID:22120592
• CRYAA es necesaria para la formación correcta de los filamentos intermedios del cristalino como parte de un complejo con BFSP1 y BFSP2.
  Referencias relacionadas: PMID:28935373
• Es un miembro de la familia de proteínas pequeñas de choque térmico (sHSP) y se expresa de forma predominante en el cristalino ocular a nivel proteico.
• La localización subcelular incluye tanto el citoplasma como el núcleo.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, fosforilación, oxidación y formación de enlaces disulfuro, que pueden regular su actividad chaperona.
• Las mutaciones en CRYAA están asociadas a cataratas autosómicas dominantes, lo que destaca su importancia en la fisiología del cristalino.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la proteína CRYAA humana de longitud completa (aminoácidos 1-173), lo que puede permitir un reconocimiento amplio tanto de las formas nativas como desnaturalizadas. Para Western blot, se debe detectar una banda específica alrededor de 20 kDa en las muestras positivas; se recomienda utilizar un control de proteína recombinante para la verificación.
• La reactividad cruzada está confirmada con humano, ratón, rata y pez cebra; por lo tanto, el anticuerpo es adecuado para estudios entre especies. Sin embargo, se recomienda la validación en su sistema de modelo específico.
• Para inmunofluorescencia (IF-P, inmunofluorescencia sobre sección de tejido fijado y embebido en parafina), probablemente se requiere la permeabilización de células o secciones de tejido para detectar la CRYAA citoplasmática y nuclear. Se aconseja la optimización de las condiciones de fijación y permeabilización.
• En aplicaciones de ELISA, el anticuerpo puede utilizarse para la captura o detección de antígenos. La combinación con un anticuerpo secundario o sistema de detección correspondiente debe optimizarse de forma empírica.
• Dado que CRYAA puede existir tanto en forma reducida como oxidada en diferentes condiciones, tenga en cuenta las condiciones de preparación de la muestra (por ejemplo, reductor vs no reductor) para estudiar estados redox específicos.

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