Anticuerpo policlonal anti-CRYZ para WB y ELISA - Q08257

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CRYZ

• CRYZ (cristalina zeta) es una proteína multifuncional que posee actividades tanto de estabilización del ARNm como de oxidoreducción enzimática. Se une a elementos ricos en AU (ARE) en la región 3'-UTR de los ARNm diana para mejorar su estabilidad, incluidos los ARNm que codifican SLC12A1, enzimas implicadas en el catabolismo de la glutamina y la proteína antiapoptótica BCL2. También cataliza la reducción de ortoquinonas en presencia de NADPH, lo que sugiere un papel en la detoxificación de xenobióticos y la protección frente al estrés oxidativo. Referencias relacionadas: PMID:17497241 PMID:20103721
• Durante la acidosis metabólica, CRYZ contribuye a los aumentos adaptativos de la amoniogénesis renal y la reabsorción transepitelial de NH4+ mediante la estabilización de los ARNm de las enzimas del catabolismo de la glutamina y del cotransportador SLC12A1 en la rama ascendente gruesa medular del riñón.
• CRYZ se localiza predominantemente en el citoplasma/citosol, en consonancia con sus funciones en la estabilización del ARNm y las reacciones enzimáticas.
• Especificidad tisular: CRYZ se expresa en niveles muy bajos en el cristalino, en contraste con su mayor expresión en otros tejidos, donde participa en la regulación del ARNm y el equilibrio redox.
• El gen CRYZ experimenta corte y empalme alternativo, y la proteína está sujeta a modificaciones postraduccionales, incluida la acetilación y la fosforilación (según se indica en las palabras clave de UniProt), que pueden regular su actividad o sus interacciones.
• Peso molecular de la proteína: la isoforma canónica tiene un peso molecular calculado de aproximadamente 35,2 kDa (UniProt: 35207 Da), aunque el proveedor indica 35 kDa.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado fue una proteína de fusión recombinante correspondiente a los aminoácidos 1-329 de CRYZ humano (NP_001123514.1), que abarca la proteína de longitud completa. Este diseño puede permitir la detección de múltiples isoformas, pero debe realizarse una validación para las variantes de corte y empalme específicas.
• Se recomienda utilizar este anticuerpo en aplicaciones de Western blot (WB) y ELISA. Para WB, considere un intervalo de dilución inicial habitual para anticuerpos policlonales (por ejemplo, 1:500-1:2000) y valide el resultado en su sistema de muestras. El peso molecular previsto es de aproximadamente 35 kDa; se espera una banda cercana a este tamaño en lisados de humano, ratón y rata, aunque las modificaciones postraduccionales o el corte y empalme alternativo podrían desplazar la migración.
• Dado que CRYZ participa en la estabilidad del ARNm y la regulación redox, su expresión puede verse modulada por el estrés acidótico, las condiciones oxidativas u otros estímulos. Considere el uso de controles positivos adecuados (por ejemplo, líneas celulares renales sometidas a acidosis) e incluya controles de carga para el WB cuantitativo.
• Se ha informado reactividad cruzada con humano, ratón y rata, pero las variaciones de secuencia específicas de cada especie pueden afectar la afinidad. Verifique el rendimiento en su organismo modelo mediante un experimento preliminar de valoración.

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