Anticuerpo policlonal de conejo anti-CRYZ para WB, IF/ICC, ELISA - Q08257

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CRYZ

• CRYZ, también conocida como cristalina zeta o reductasa de quinonas NADPH, es una proteína multifuncional que combina la actividad enzimática de oxidorreductasa con funciones de unión y estabilización del ARNm (PubMed:17497241, PubMed:20103721).
  Referencias relacionadas:
  PMID:17497241
  PMID:20103721
• En su función en el metabolismo del ARNm, CRYZ se une a elementos ricos en AU (ARE) en la 3'-UTR de los ARNm diana, mejorando así su estabilidad y regulación postranscripcional (PubMed:17497241, PubMed:20103721).
  Referencias relacionadas:
  PMID:17497241
  PMID:20103721
• Durante la acidosis metabólica, CRYZ contribuye a las adaptaciones renales al estabilizar los ARNm de SLC12A1 y de las enzimas del catabolismo de la glutamina (por similitud), y también aumenta la expresión de la proteína antiapoptótica BCL2 mediante la estabilización del ARNm (PubMed:20103721).
  Referencias relacionadas:
  PMID:20103721
• Como oxidorreductasa, CRYZ cataliza la reducción dependiente de NADPH de ortoquinonas, como la 1,2-naftoquinona y la 9,10-fenantrenoquinona, posiblemente participando en la detoxificación de xenobióticos y la defensa frente al estrés oxidativo (PubMed:17497241).
  Referencias relacionadas:
  PMID:17497241
• La proteína se localiza predominantemente en el citoplasma, específicamente en el citosol, en consonancia con sus funciones metabólicas y de regulación del ARNm.
• La expresión de CRYZ es principalmente extralenticular; solo se detectan cantidades muy bajas en el cristalino, lo que indica una función fisiológica más amplia que la función de cristalina.
• Entre las modificaciones postraduccionales se incluyen la acetilación y la fosforilación, y el corte y empalme alternativo genera múltiples variantes de transcritos, lo que potencialmente modula su actividad y sus interacciones.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno comprende la proteína CRYZ humana de longitud completa (aminoácidos 1–329), lo que sugiere que el anticuerpo policlonal puede reconocer múltiples epítopos y ofrecer potencialmente una amplia reactividad en diferentes aplicaciones y especies.
• Para el Western blot (WB), se espera una banda predominante de aproximadamente 35 kDa; se recomienda considerar el uso de lisados de control positivo de líneas celulares o tejidos conocidos por expresar CRYZ (por ejemplo, riñón e hígado) y validar con controles de carga adecuados.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), las condiciones óptimas de fijación y permeabilización deben determinarse empíricamente, ya que CRYZ es una proteína citosólica; se recomienda considerar protocolos estándar con fijación con paraformaldehído y permeabilización con Triton X-100.
• Para aplicaciones de ELISA, el anticuerpo puede evaluarse como reactivo de captura o de detección; se debe realizar una titulación para determinar las concentraciones de trabajo óptimas y validar mediante proteína recombinante o muestras positivas caracterizadas.
• Se espera reactividad cruzada con los ortólogos de ratón y rata según las especificaciones del producto; verifique la reactividad en su sistema modelo específico antes de realizar experimentos a gran escala.
• Como ocurre con cualquier anticuerpo policlonal, puede existir variabilidad entre lotes; valide siempre los lotes nuevos con controles positivos conocidos.

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