Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Cullina 2 (CUL2) para WB, IHC-P, ELISA - Q13617

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la Cullina 2

• La Cullina-2 (CUL2) actúa como una proteína de andamiaje rígido en múltiples complejos de ligasa E3 de ubiquitina basados en cullina-RING (ECS: ElonginB/C-CUL2/5-caja SOCS), mediando la ubiquitinación del sustrato y su posterior degradación proteosomal. Referencias relacionadas: PMID:11384984, PMID:26138980, PMID:29775578

• La actividad del complejo ECS está estrictamente regulada por la neddilación de la cullina, que activa la función de la ligasa E3, y por el inhibidor CAND1, que se une a la CUL2 desneddilada y evita el reclutamiento espurio de sustratos. Referencias relacionadas: PMID:12609982, PMID:24076655, PMID:27565346

• Entre los complejos ECS específicos de sustrato, el ECS(VHL) se dirige al factor inducible por hipoxia (HIF) para su ubiquitinación, desempeñando un papel crítico en la detección celular de oxígeno y la respuesta hipóxica. Referencias relacionadas: PMID:10973499, PMID:9122164

• La Cullina-2 es también un componente clave de la vía DesCEND (destrucción a través de degrones C-terminales), donde las subunidades de reconocimiento de sustrato como KLHDC2, KLHDC3, KLHDC10, APPBP2, FEM1A, FEM1B o FEM1C reconocen motivos C-terminales específicos en las proteínas diana, lo que lleva a su recambio dependiente de ubiquitina. Referencias relacionadas: PMID:26138980, PMID:29775578, PMID:29779948

• Los complejos ECS y la ligasa de ubiquitina ARIH1 colaboran en un mecanismo en tándem para mediar una ubiquitinación eficiente del sustrato. Referencias relacionadas: PMID:27565346

• La CUL2 se localiza predominantemente en el núcleo, lo que es consistente con su papel en la regulación de la estabilidad de las proteínas nucleares y el recambio de factores de transcripción.

• Las modificaciones postraduccionales de la Cullina-2 incluyen neddilación, fosforilación y acetilación; el empalme alternativo genera múltiples isoformas, y participa en interacciones huésped-virus.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aa 1-100) de la Cullina 2 humana, un área probablemente expuesta tanto en conformaciones nativas como desnaturalizadas. Considere usar este anticuerpo en inmunotransferencia (Western blot) en condiciones reductoras, con una banda esperada a 87–89 kDa.
• Debido a la reactividad cruzada con ratón y rata, valide la especificidad del anticuerpo en estas especies mediante controles de silenciamiento con siRNA o knockout.
• Para inmunohistoquímica (secciones de parafina), la recuperación antigénica usando tampón citrato (pH 6.0) o tampón EDTA (pH 9.0) puede mejorar la tinción nuclear.
• El rendimiento óptimo en ELISA depende del antígeno de recubrimiento apropiado y de la titulación del anticuerpo; incluya una curva estándar con proteína CUL2 recombinante si está disponible.
• El uso de este anticuerpo junto con otros anticuerpos de la familia Cullin puede ayudar a disecar complejos específicos de ligasa E3 en aplicaciones de inmunoprecipitación.

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