Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Cullin 4A para WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q13619

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Cullin-4A

• CUL4A sirve como una proteína de andamio central dentro de los complejos ligasas de ubiquitina E3 tipo cullin-RING (CRLs), permitiendo la transferencia de ubiquitina a las proteínas sustrato mediante el posicionamiento tanto del sustrato como de la enzima conjugadora de ubiquitina. La actividad de ligasa depende de la nedilación de cullin y se inhibe por la asociación de CUL4A desnedilada con CAND1. Referencias relacionadas: PMID:14578910, PMID:14739464, PMID:15448697
• El complejo DCX(DDB2) emplea DDB2 como receptor de sustrato para ubiquitinar XPC, histonas H3-H4 y otros objetivos, desempeñando funciones críticas en la reparación por escisión de nucleótidos y el ensamblaje de nucleosomas acoplado a la replicación. Referencias relacionadas: PMID:15811626, PMID:16678110, PMID:17041588, PMID:24209620
• A través del complejo DCX(DTL), CUL4A media la poliubiquitinación dependiente de PCNA de CDT1 y la ubiquitinación dependiente de MDM2 de p53/TP53 en respuesta al daño del ADN y durante la replicación del ADN, y también dirige la autoubiquitinación de DTL. Además, el complejo DDB1-CUL4A-DTL regula el ritmo circadiano mediante la ubiquitinación de CRY1 para su degradación. Referencias relacionadas: PMID:14578910, PMID:15448697, PMID:15548678, PMID:23478445, PMID:26431207
• El complejo DCX(ERCC8) (complejo CSA) participa en la reparación acoplada a la transcripción (TCR), eliminando lesiones del ADN de los genes activamente transcritos. Referencias relacionadas: PMID:12732143, PMID:32355176, PMID:38316879
• El complejo DCX(AMBRA1) funciona como un regulador maestro de la transición del ciclo celular G1/S al dirigir la ciclina D fosforilada (CCND1, CCND2, CCND3) para su ubiquitinación y degradación. También regula los complejos CRL5 a través de la ubiquitinación y degradación de Elongin-C (ELOC). Referencias relacionadas: PMID:33854232, PMID:33854239, PMID:30166453
• CUL4A está implicado en la ubiquitinación de numerosos otros sustratos, incluyendo JUN (vía DET1-COP1), CDKN1B/p27 (con DDB1-SKP2) y HOXA9, destacando sus amplios roles regulatorios. Referencias relacionadas: PMID:14739464, PMID:16537899, PMID:14609952
• Junto con CUL4B, CUL4A contribuye a la biogénesis de ribosomas. Referencias relacionadas: PMID:26711351

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 1-300 de CUL4A humano, lo que indica que el anticuerpo se dirige a la región N-terminal; esto puede influir en la accesibilidad del epítopo en ciertos ensayos.
• En la transferencia Western (Western blotting, WB), espere una banda a aproximadamente 88 kDa; incluya inhibidores de proteasas durante la lisis y considere usar muestras frescas para evitar la degradación.
• Para la inmunoprecipitación (IP), valide la capacidad del anticuerpo para capturar complejos nativos de CUL4A en condiciones no desnaturalizantes.
• Para la inmunofluorescencia (IF/ICC), optimice los protocolos de fijación/permeabilización, ya que CUL4A es predominantemente nuclear; confirme la especificidad de la tinción con los controles apropiados.
• Este anticuerpo presenta reactividad cruzada con CUL4A humano, de ratón y de rata; al usar muestras de roedores, asegúrese de que el sistema de detección sea compatible y de que la banda objetivo sea distinguible de las inmunoglobulinas endógenas en la IP.
• Al ser un anticuerpo policlonal, puede ocurrir variabilidad entre lotes; considere titular el anticuerpo para cada nueva aplicación e incluir controles positivos y negativos.

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