Anticuerpo policlonal de conejo anti-CXCL12/SDF-1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P48061

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CXCL12

• CXCL12, también conocido como factor 1 derivado de células del estroma (SDF-1), es una quimiocina CXC secretada que existe como múltiples isoformas (alfa, beta, gamma, delta, épsilon, theta) debido al empalme alternativo.
• CXCL12 funciona como un quimioatrayente para linfocitos T y monocitos, pero no para neutrófilos, al unirse y activar el receptor CXCR4, lo que conduce a una rápida movilización de calcio intracelular y migración celular dirigida. Referencias relacionadas: PMID:18802065, PMID:39093700, PMID:8752281
• También se une al receptor de quimiocina atípico ACKR3 (CXCR7), que actúa como un receptor carroñero y activa la vía de señalización de beta-arrestina. Referencias relacionadas: PMID:16107333, PMID:19255243
• CXCL12 puede activar las integrinas ITGAV:ITGB3, ITGA4:ITGB1 e ITGA5:ITGB1 a través de un sitio de unión alostérico, independiente de CXCR4. Referencias relacionadas: PMID:29301984
• Regula positivamente la migración de monocitos y regula negativamente la adhesión de monocitos a través de un mecanismo mediado por la quinasa LYN que inhibe la unión de LFA-1 a ICAM-1. Referencias relacionadas: PMID:18802065
• Una forma truncada, SDF-1-alfa(3-67), muestra una actividad quimiotáctica reducida; la unión a proteoglicanos de la superficie celular inhibe su formación, preservando así la actividad de CXCL12 de longitud completa localmente. Referencias relacionadas: PMID:14525775
• Las isoformas alfa y beta se expresan de forma ubicua con los niveles más altos en hígado, páncreas y bazo, mientras que la isoforma gamma se expresa principalmente en el corazón, y las isoformas delta, épsilon y theta muestran la mayor expresión en el páncreas.
• La proteína secretada madura contiene características estructurales importantes, incluidos dos enlaces disulfuro y un péptido señal, con un peso molecular de aproximadamente 11 kDa.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 40–93 de CXCL12 humano (NP_000600.1), una región dentro del dominio de la quimiocina madura; por lo tanto, se espera que el anticuerpo reconozca la proteína secretada. Para Western blot, prepare muestras en condiciones reductoras y utilice un protocolo estándar de SDS-PAGE. Considere un rango de dilución inicial de 1:500–1:2000, seguido de optimización.
• Para IHC-P, realice una recuperación de antígeno inducida por calor y valide la tinción con controles de tejido apropiados. CXCL12 es secretada, por lo que pueden observarse patrones de tinción extracelular.
• En IF/ICC, considere usar un inhibidor de secreción (por ejemplo, brefeldina A) para mejorar la señal intracelular; optimice las condiciones de fijación/permeabilización. El anticuerpo puede marcar la vía de Golgi/secreción.
• El anticuerpo reacciona de forma cruzada con CXCL12 de ratón y rata, lo que lo hace adecuado para estudios en estas especies. Sin embargo, confirme siempre la especificidad en el sistema modelo relevante.
• Debido al empalme alternativo, pueden detectarse múltiples bandas en WB; compare con los pesos moleculares conocidos de las isoformas (alfa ~11 kDa). Utilice un control positivo (por ejemplo, CXCL12 recombinante o líneas celulares que expresen niveles altos) para verificar la reactividad.

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