Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-CXCR4 para WB, ELISA - P61073

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CXCR4

• CXCR4 (receptor de quimiocina C-X-C tipo 4, CD184, Fusin) es un receptor acoplado a proteína G (GPCR) que se une específicamente a la quimiocina CXCL12/SDF-1. La unión al ligando desencadena la transducción de señales al aumentar los niveles de iones de calcio intracelulares, potenciar la activación de MAPK1/MAPK3 e inhibir la adenilato ciclasa mediante el acoplamiento a proteínas Gi. Referencias relacionadas: PMID:10074102, PMID:10452968, PMID:10644702, PMID:16725153, PMID:17197449, PMID:18799424, PMID:39093700
• La señalización de CXCR4 participa en la vía AKT y regula la migración celular, cumpliendo un papel fundamental en la cicatrización de heridas. Referencias relacionadas: PMID:24912431, PMID:28978524
• Además de CXCL12, CXCR4 actúa como receptor de la ubiquitina extracelular (elevando el calcio intracelular y reduciendo el cAMP) y del lipopolisacárido bacteriano (LPS), mediando la secreción de citoquinas inflamatorias (TNF) por los monocitos. Referencias relacionadas: PMID:20228059, PMID:11276205
• En infecciones virales, CXCR4 funciona como correceptor (junto con CD4) para los aislamientos X4 del virus de la inmunodeficiencia humana 1 (VIH-1) y como receptor primario para algunos aislamientos de VIH-2, favoreciendo la entrada viral. Referencias relacionadas: PMID:10074122, PMID:10756055, PMID:8849450
• Su localización subcelular es predominantemente en la membrana plasmática y las uniones celulares, y circula por endosomas tempranos, endosomas tardíos y lisosomas.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen sulfatación, fosforilación, glicosilación y la formación de enlaces disulfuro; también está sujeta a ubiquitinación. El receptor es un proteoglucano.
• CXCR4 se expresa ampliamente, siendo la isoforma 1 la predominante, en tejidos que incluyen leucocitos de sangre periférica, bazo, timo, médula espinal, corazón, placenta, pulmón, hígado, músculo esquelético, riñón, páncreas, cerebro (cerebelo, corteza cerebral, médula, microglía, astrocitos) y células endoteliales. El empalme alternativo genera variantes adicionales.
• Por analogía, CXCR4 contribuye a la hematopoyesis, la formación del tabique ventricular cardíaco, la vascularización del tracto gastrointestinal y el desarrollo de neuronas del cerebelo y el hipocampo.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región intracelular del extremo C-terminal (aa 253-352), lo que indica que el anticuerpo probablemente reconoce un epítopo dentro del dominio citoplasmático. Para Western blot, se recomiendan condiciones desnaturalizantes y reductoras para exponer el epítopo.
• En Western blot, el peso molecular predicho de CXCR4 es de aproximadamente 40 kDa; sin embargo, debido a la glicosilación y otras modificaciones postraduccionales, la banda aparente puede desplazarse a un peso molecular mayor en ciertos tipos celulares.
• Para aplicaciones de ELISA, considere combinarlo con un anticuerpo de detección dirigido a un epítopo extracelular diferente si está desarrollando un ensayo sándwich. Valide siempre las condiciones del ensayo con controles positivos y negativos adecuados.
• Dado que CXCR4 se expresa en muchas células inmunitarias y endoteliales, buenos lisados de control positivo incluyen Jurkat, THP-1 o PBMC; para tejido, el bazo o el timo pueden funcionar bien.
• Si estudia la función de correceptor del VIH, tenga en cuenta que el anticuerpo puede no bloquear la entrada viral, ya que reconoce un epítopo intracelular.

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