Anticuerpo policlonal de conejo anti-CYBA para WB, IF/ICC, ELISA - P13498

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CYBA (p22phox)

• CYBA codifica la proteína p22phox, la cadena ligera del complejo citocromo b-245 (también conocido como citocromo b(558)), que es una subunidad esencial del complejo NADPH oxidasa de los fagocitos. Referencias relacionadas: PMID:15824103, PMID:17140397, PMID:38355798

• El complejo NADPH oxidasa transfiere electrones del NADPH citosólico al oxígeno molecular, generando el anión superóxido (O2(-)), una especie reactiva de oxígeno esencial para la defensa del huésped y la señalización celular. Referencias relacionadas: PMID:38355798

• p22phox actúa como andamiaje para el ensamblaje de las subunidades reguladoras citosólicas, y su región C-terminal se fosforila, lo que permite la unión de NCF1/p47-phox para iniciar la activación del complejo. Referencias relacionadas: PMID:19948736

• CYBA también se asocia con NOX3 para formar una NADPH oxidasa constitutivamente activa que genera superóxido en células no fagocíticas. Referencias relacionadas: PMID:15824103, PMID:17140397

• La proteína se localiza en la membrana celular y en la membrana fagosómica tras la activación.

• CYBA contiene hélices transmembrana y se une a cofactores de hemo y hierro esenciales para la transferencia de electrones.

• Las mutaciones en CYBA están asociadas con la enfermedad granulomatosa crónica (CGD), una inmunodeficiencia primaria caracterizada por una producción defectuosa de superóxido.

• La proteína está sujeta a modificaciones postraduccionales, incluidas la fosforilación y la ubiquitinación.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 126–195 de CYBA humano, una región conservada entre humanos, ratones y ratas, en consonancia con la reactividad cruzada observada. Para la detección de CYBA endógeno, considere validar el anticuerpo en líneas celulares relevantes (por ejemplo, neutrófilos y macrófagos) o tejidos.
• Para western blot, se espera un peso molecular previsto de 21 kDa. Sin embargo, las modificaciones postraduccionales pueden causar ligeros desplazamientos. Incluya controles positivos y negativos adecuados.
• En aplicaciones de inmunofluorescencia, CYBA se localiza en la membrana plasmática, por lo que deben observarse patrones de tinción de membrana. Las condiciones de permeabilización deben optimizarse para el tipo de célula diana.
• Los protocolos de ELISA deben optimizarse con un tampón de recubrimiento y un sistema de detección adecuados, garantizando un bloqueo apropiado para reducir la unión inespecífica.

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