Anticuerpo Policlonal Anti-CYP2F1 para WB, IHC-P, ELISA - P24903

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CYP2F1

• El Citocromo P450 2F1 (CYP2F1) es un miembro de la superfamilia de monooxigenasas del citocromo P450, que catalizan la oxidación de sustancias orgánicas y son clave en el metabolismo de xenobióticos y compuestos endógenos.
• La enzima puede participar en el metabolismo de diversos neumotóxicos, incluido el naftaleno, y es capaz de desalquilar etoxicumarina, propoxicumarina y pentoxiresorufina, aunque no muestra actividad frente a etoxiresorufina y solo presenta actividad de desarilación traza frente a benciloxiresorufina.
• CYP2F1 bioactiva la 3-metilindol (3MI) mediante deshidrogenación hasta el electrófilo putativo 3-metileno-indolenina, un compuesto implicado en la toxicidad pulmonar.
• Esta proteína se localiza en la membrana del retículo endoplásmico y en la membrana de los microsomas, lo que coincide con su función en el sistema de monooxigenasa microsomal.
• La expresión tisular es predominantemente en el pulmón, con detección rara en hígado y placenta, lo que resalta su función especializada en el metabolismo del tracto respiratorio.
• CYP2F1 contiene un grupo prostético hemo y un cofactor de hierro, esenciales para su actividad catalítica, y se clasifica como una oxidoreductasa. Se ha descrito el empalme alternativo del gen CYP2F1 que potencialmente genera diferentes isoformas.
• El peso molecular calculado de la isoforma canónica es de aproximadamente 55,5 kDa, lo que coincide con la banda observada de 56 kDa en SDS-PAGE.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 100–290 de CYP2F1 humano, una región que probablemente se encuentra dentro del dominio citoplásmico y puede presentar suficiente conservación entre especies para permitir la reactividad cruzada observada en humano, ratón y rata.
• Para Western blot, se puede probar una dilución inicial típica para anticuerpos policlonales (por ejemplo, 1:500–1:2000), y el ensayo debe validarse en una línea celular derivada de pulmón o lisado de tejido donde se espera la expresión de CYP2F1.
• En IHC-P, pueden ser necesarios métodos de recuperación de antígeno (por ejemplo, recuperación de epitopo inducida por calor a pH 6 o 9); incluya controles adecuados como secciones de tejido pulmonar. Se recomienda realizar pruebas preliminares con diferentes protocolos de fijación.
• Para ELISA, el anticuerpo se puede usar como reactivo de captura o detección en formato sándwich, pero debe evaluarse la reactividad cruzada con otros miembros de la familia CYP debido a las similitudes de secuencia.
• Dado que CYP2F1 es una proteína de membrana, considere usar detergentes suaves en los buffers de lisis (por ejemplo, 1% de NP-40 o Triton X-100) para garantizar una solubilización adecuada.

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