Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-CYP51A1 para WB, IHC-P, ELISA - Q16850

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CYP51A1

• CYP51A1, también conocido como lanosterol 14-alfa demetilasa, pertenece a la superfamilia del citocromo P450 y es la única enzima de citocromo P450 conservada en todos los reinos biológicos (bacterias, hongos, plantas y animales). Es una enzima clave en la vía de biosíntesis de esteroles, responsable de la conversión de lanosterol a colesterol en mamíferos.
• Actividad catalítica: Cataliza la eliminación oxidativa en tres pasos del grupo 14alfa-metilo (C-32) de esteroles como el lanosterol y el 24,25-dihidrolanosterol, produciendo formiato y convirtiéndolos en 4,4-dimetil-5alfa-colesta-8,14,24-trien-3beta-ol y 4,4-dimetil-8,14-colestadien-3beta-ol, respectivamente. Estos son intermediarios críticos en la biosíntesis de colesterol. Referencias relacionadas: PMID:20149798, PMID:8619637, PMID:9559662
• La enzima es una proteína integral de membrana localizada en el retículo endoplásmico y las membranas microsomales, lo cual coincide con su papel en el metabolismo de lípidos.
• Contiene un grupo prostético hemo y requiere hierro como cofactor, una característica de la actividad monooxigenasa que utiliza oxígeno molecular y NADPH.
• CYP51A1 presenta una especificidad de sustrato amplia; además de los esteroles de mamíferos, puede desmetilar sustratos no mamíferos como el eburicol, aunque con menor eficiencia. Referencias relacionadas: PMID:9559662
• La proteína se expresa de forma ubicua, y se observan los niveles más altos en testículo, ovario, glándula suprarrenal, próstata, hígado, riñón y pulmón, lo que refleja la alta demanda de colesterol en los tejidos esteroidogénicos y en la síntesis de membranas.
• El empalme alternativo genera múltiples variantes de transcrito, que pueden modular la función o la regulación de la enzima.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la conjugación con proteínas similares a la ubiquitina (Ubl), que puede afectar la estabilidad, localización o actividad de la proteína.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno utilizado es una proteína recombinante correspondiente a los aminoácidos 400-500 de CYP51A1 humano, dirigida a la región C-terminal. Es probable que esta región esté bien expuesta en condiciones nativas y desnaturalizadas, por lo que el anticuerpo es adecuado para múltiples aplicaciones.
• Para el análisis de Western blot (WB), se espera una banda de aproximadamente 57 kDa. Considere utilizar marcadores de peso molecular adecuados y valide la especificidad utilizando líneas celulares o tejidos positivos para CYP51A1 (por ejemplo, hígado, testículo).
• En inmunohistoquímica (IHC-P), puede ser necesaria la recuperación de antígeno. Pruebe en tejidos control positivos conocidos como hígado o glándula suprarrenal, e incluya controles de isotipo para confirmar patrones de tinción específicos en el retículo endoplásmico.
• Para ELISA, el anticuerpo se puede usar como reactivo de detección o captura. Combínelo con un estándar adecuado, como el inmunógeno recombinante o la proteína CYP51A1 purificada, y valídelo en la matriz de muestra correspondiente.
• Dada la alta homología de secuencia entre CYP51A1 de humano, ratón y rata, se espera la reactividad cruzada. Sin embargo, se recomienda la validación experimental en cada especie si se utiliza para muestras no humanas.
• Al manipularlo, almacénelo a las temperaturas recomendadas y evite ciclos repetidos de congelación-descongelación para preservar su actividad.

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