Anticuerpo Policlonal Anti-Citoqueratina 14 (KRT14) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P02533

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Citoqueratina 14

• La queratina, tipo I citoesquelética 14 (KRT14), también designada como Citoqueratina-14 (CK-14) y Queratina-14 (K14), es un miembro de la familia de queratinas tipo I de proteínas de filamentos intermedios.
• KRT14 forma heteropolímeros obligatorios con la queratina tipo II KRT5, contribuyendo a la red de filamentos intermedios de queratina que confiere resistencia mecánica e integridad estructural a la capa basal de la epidermis y otros epitelios estratificados. Referencias relacionadas: PMID:11724817 PMID:1694855 PMID:1720261
• El dominio de la cola no helicoidal de KRT14 promueve que los filamentos KRT5-KRT14 se auto-organicen en grandes haces y mejora la resistencia mecánica de los filamentos intermedios de queratina in vitro. Referencias relacionadas: PMID:11724817
• Subcelularmente, KRT14 se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo, consistente con su papel en el mantenimiento de la arquitectura del citoesqueleto y sus posibles funciones nucleares.
• La expresión tisular es prominente en los queratinocitos basales de los epitelios estratificados: detectada en el epitelio corneal, la capa epidérmica basal y la vaina radicular externa de los folículos pilosos en anágeno, pero ausente en las capas suprabasales terminalmente diferenciadas como el estrato córneo.
• Las variaciones genéticas en KRT14 están asociadas con múltiples trastornos hereditarios de fragilidad cutánea, incluyendo epidermólisis bullosa simple, displasia ectodérmica y queratodermia palmoplantar.
• La proteína sufre modificaciones postraduccionales que incluyen fosforilación y ubiquitinación, y contiene dominios de hélice superenrollada y enlaces disulfuro esenciales para el ensamblaje y estabilidad de los filamentos.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 371-470 dentro del dominio de la cola no helicoidal C-terminal; el anticuerpo puede reconocer preferentemente epítopos en esta región crítica para la formación de haces y la resistencia mecánica.
• Para Western blot, se espera una banda cerca de 52 kDa en lisados de queratinocitos; valide la identificación de la banda usando controles positivos (por ejemplo, lisado de células HaCaT) y considere que las modificaciones postraduccionales pueden causar ligeros cambios en la migración.
• En inmunohistoquímica (parafina) e inmunofluorescencia, se anticipa una tinción citoplasmática y nuclear fuerte en células epiteliales basales; secciones de piel, córnea o mucosa oral son tejidos de control positivo adecuados.
• La reactividad cruzada reportada con humano, ratón y rata sugiere epítopos conservados; sin embargo, para su uso en otras especies o aplicaciones que requieran alta especificidad, se recomienda una alineación de secuencias de la región del inmunógeno.
• Como anticuerpo policlonal, la consistencia entre lotes puede variar; valide cada nuevo lote en su sistema de ensayo, especialmente para aplicaciones cuantitativas como ELISA.
• Para ELISA, el inmunógeno de péptido sintético puede servir como antígeno de recubrimiento para la titulación de anticuerpos o como control positivo para evaluar la actividad unida a la placa.

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