Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-Citoqueratina 14 (KRT14) para WB, IHC-P, ELISA - P02533

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la Citoqueratina 14

• KRT14 es una proteína de filamento intermedio de tipo I esencial para la estructura de los queratinocitos basales. Forma heteropolímeros obligados con KRT5, estableciendo una red citoesquelética resistente que proporciona fuerza mecánica a la epidermis y otros epitelios estratificados. Referencias relacionadas: PMID:11724817, PMID:1694855, PMID:1720261

• El dominio de cola no helicoidal de KRT14 promueve el autoensamblaje de los filamentos KRT5-KRT14 en haces grandes, aumentando la resistencia de los filamentos in vitro. Referencias relacionadas: PMID:11724817

• KRT14 se localiza principalmente en el citoplasma, pero también puede encontrarse en el núcleo. Se expresa de forma abundante en la capa basal de los epitelios estratificados, incluyendo la epidermis, el epitelio corneal y la vaina externa de los folículos pilosos, con una expresión disminuida en las capas suprabasales.

• Modificaciones postraduccionales como la fosforilación, la formación de enlaces disulfuro y la ubiquitinación pueden regular la dinámica y estabilidad de los filamentos de KRT14.

• Las variantes patogénicas en KRT14 están asociadas a síndromes de fragilidad cutánea como el epidermólisis bullosa simple (EBS) y la displasia ectodérmica, lo que resalta su papel esencial en la integridad epitelial.

• La expresión de KRT14 es altamente específica de tejido: está presente en los queratinocitos basales y alrededor del pelo club durante el telógeno, pero está ausente en el estrato córneo y la vaina interna del folículo piloso.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca el dominio de barra central de KRT14 humano (aa 264-457); debido a la alta homología, se espera que el anticuerpo tenga reactividad cruzada con KRT14 de ratón y rata, según lo indicado por el proveedor. Valide siempre en la especie/tejido correspondiente.

• Para Western blot, se espera una banda de ~52 kDa; optimice la carga y la dilución del anticuerpo para una detección clara en lisados de tejidos ricos en queratinocitos (por ejemplo, piel, mucosa oral).

• Para IHC-P, utilice secciones fijadas en formalina e incluidas en parafina; puede ser necesaria la recuperación de antígeno. La tinción de KRT14 marca las células basales; se espera una señal positiva en la capa basal de la epidermis y otros epitelios estratificados.

• En aplicaciones de ELISA, utilice proteína KRT14 recombinante purificada como estándar y valide con muestras positivas y negativas conocidas.

• Dado que KRT14 forma complejos con KRT5, considere experimentos de coinmunoprecipitación para estudiar el ensamblaje de los filamentos de queratina.

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