Anticuerpo policlonal de conejo anti-citoqueratina 9 (KRT9) para WB, IF-P, ELISA - P35527

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la citoqueratina 9 (KRT9)

• La citoqueratina 9 (KRT9), también conocida como queratina-9 (K9) o CK-9, es una queratina citoesquelética de tipo I codificada por el gen KRT9 en humanos.
• Actúa como componente estructural de los filamentos intermedios específicamente en los queratinocitos suprabasales de la epidermis palmoplantar, ensamblándose con queratinas de tipo II para formar redes de queratina resistentes.
• Estas redes de filamentos intermedios de queratina son esenciales para mantener la integridad mecánica y la resistencia de la piel de las palmas de las manos y las plantas de los pies, soportando una presión y fricción considerables.
• La expresión de KRT9 está estrictamente restringida a la epidermis terminalmente diferenciada de las palmas de las manos y las plantas de los pies, lo que destaca su función especializada en estas zonas corporales sometidas a un alto nivel de estrés.
• Las mutaciones en KRT9 están asociadas con la queratodermia palmoplantar epidermolítica (EPPK), un trastorno cutáneo autosómico dominante caracterizado por el engrosamiento difuso de la piel de las palmas de las manos y las plantas de los pies.
• La estructura de la proteína presenta un dominio central en forma de bastón con hélices superenrolladas, típico de las proteínas de filamentos intermedios, que facilita la dimerización y el ensamblaje de los filamentos.
• La regulación postraduccional puede incluir eventos de fosforilación, según indican los estudios proteómicos.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 150–450 de la KRT9 humana, una región interna. Este diseño puede permitir la detección de la proteína KRT9 total en diversos tipos de muestras.
• Para Western blot (WB), utilice condiciones desnaturalizantes y reductoras, y considere incluir un control de carga como GAPDH o β-actina. El peso molecular previsto es de aproximadamente 62 kDa; valide la identidad de la banda utilizando controles positivos adecuados (por ejemplo, lisado de piel de la palma) y controles negativos.
• Para inmunofluorescencia (IF-P), deben optimizarse los métodos de fijación y permeabilización. Dado que KRT9 es un filamento intermedio citoplasmático, la permeabilización es esencial. Incluya una tinción nuclear de contraste como DAPI para visualizar la localización celular.
• Para aplicaciones de ELISA, titule el anticuerpo utilizando KRT9 recombinante o lisados celulares para determinar las diluciones de trabajo óptimas. El uso conjunto de un anticuerpo de detección compatible puede mejorar la sensibilidad.
• Se ha informado reactividad cruzada con muestras humanas, de ratón y de rata; sin embargo, verifique la especificidad en la especie y el contexto tisular relevantes, ya que la expresión está limitada a la epidermis de las palmas de las manos y las plantas de los pies.

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