Anticuerpo Policlonal Anti-DAG1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q14118

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de DAG1

• La distroglicana 1 (DAG1) es un componente central del complejo distrofina-glicoproteína, que conecta la matriz extracelular con el citoesqueleto intracelular. Se expresa como un precursor que sufre un procesamiento de autocorte en la alfa-distroglicana periférica y la beta-distroglicana transmembrana.
• El complejo de distroglicana participa en la deposición de laminina y el ensamblaje de la matriz extracelular, la agrupación de receptores de acetilcolina en la unión neuromuscular, la estabilidad sarcolemal, la supervivencia celular, la mielinización del nervio periférico, la migración celular, la polarización epitelial y la morfogénesis de ramificación epitelial.
• La alfa-distroglicana se une a proteínas de la matriz extracelular que contienen el dominio G de laminina (p. ej., laminina-1/-2, agrina, perlucán) y media la señalización a través de las vías PI3K/AKT y Src-cinasa, regulando así las señales apoptóticas y la organización sináptica.
• La beta-distroglicana se ancla a la distrofina (DMD) o utrofina (UTRN) y actúa como andamio para la axina en el citoesqueleto de actina, facilitando la señalización mediada por adhesión celular y la polaridad celular.
• En el cartílago, a DAG1 se une a la agrina y regulan al alza el factor de transcripción condrogénico SOX9, regulando positivamente la formación del cartílago.
  Referencias relacionadas: PMID:26290588
• La proteína se localiza en múltiples compartimentos: el sarcolema y la membrana postsináptica, los sitios sinápticos, la membrana basal, el espacio extracelular, el citoplasma/citoesqueleto y el nucleoplasma.
• DAG1 actúa como un receptor celular huésped para arenavirus del Nuevo Mundo de clase C (Lassa, virus de la coriomeningitis linfocítica) y para la entrada de Mycobacterium leprae en las células de Schwann.
  Referencias relacionadas: PMID:16254364, PMID:17360738, PMID:19324387, PMID:9851927
• Se expresa en una variedad de tejidos fetales y adultos, con una localización prominente en la membrana basal de la epidermis y expresión en queratinocitos y fibroblastos.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno (aa 654–749) reside en la porción C-terminal de la beta-distroglicana; se espera que el anticuerpo reconozca tanto el precursor de longitud completa de ~97 kDa como la subunidad beta escindida (~43 kDa) en western blots desnaturalizantes/reductores.
• Para la transferencia Western (Western blotting), valide el patrón de bandas observado en tejidos/líneas celulares positivos conocidos (p. ej., músculo esquelético, cerebro) y considere el uso de lisados frescos con inhibidores de proteasas para evitar la degradación.
• En inmunofluorescencia/ICC, se requiere la permeabilización para acceder al epítopo intracelular. La tinción simultánea con marcadores sarcolemmales o de membrana basal puede confirmar la localización.
• Para aplicaciones de ELISA, titre el anticuerpo como reactivo de captura o detección utilizando fragmentos recombinantes de DAG1 o lisados celulares en condiciones estándar; el rendimiento debe optimizarse en el sistema de ensayo del usuario final.
• Se ha informado reactividad cruzada de especies para humano, ratón y rata; si trabaja con otras especies, pruebe experimentalmente y confirme la homología de secuencia de antemano.

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