Anticuerpo Monoclonal Anti-DAP Kinase 1 (DAPK1) para WB y ELISA - P53355

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de DAP Kinase 1 (DAPK1)

• Codifica una serina/treonina quinasa dependiente de calcio/calmodulina que integra señales para la apoptosis, la autofagia y la supervivencia celular dependiendo del contexto celular.
• Media tanto la muerte apoptótica tipo I dependiente de caspasas como la muerte autofágica tipo II independiente de caspasas, caracterizada por la acumulación de vesículas autofágicas.
• Regula diversos sustratos, incluyendo PIN1, TPM1, STX1A, PRKD1, BECN1, TSC2, RPS6, MYL9, DAPK3 y GRINB, influyendo así en la dinámica del citoesqueleto, la exocitosis, la señalización de estrés, la inducción de autofagia, la actividad de mTORC1 y la excitotoxicidad mediada por receptores NMDA.
• La isoforma 2 carece de actividad apoptótica pero conserva la capacidad de inducir el blebbing de membrana; se expresa en tejido intestinal normal y en carcinomas colorrectales.
• Se localiza en el citoplasma y se asocia con el citoesqueleto.
• Contiene dominios distintivos: dominio quinasa N-terminal, región de unión a calmodulina, repeticiones de anquirina y un dominio de muerte C-terminal; también posee motivos de unión a ATP y GTP.
• Figura bajo palabras clave que incluyen splicing alternativo, apoptosis, autofagia, fosfoproteína y conjugación Ubl, lo que refleja su compleja regulación y versatilidad funcional.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno se encuentra dentro de los residuos 250-350, una región entre el dominio quinasa y el motivo de unión a calmodulina; considere verificar la accesibilidad del epítopo en condiciones nativas frente a condiciones desnaturalizantes.
• Para Western blot, una banda principal a ~160 kDa representa la DAPK1 de longitud completa; pueden aparecer bandas adicionales derivadas de isoformas de splicing o productos de degradación; se recomienda validar con controles apropiados (por ejemplo, lisados de knockdown o knockout).
• Confirme la reactividad cruzada en muestras de ratón, ya que se informa que el anticuerpo reconoce tanto la DAPK1 humana como la de ratón.
• Para ELISA, se pueden aplicar protocolos estándar indirectos o sándwich; optimice la concentración de recubrimiento y las condiciones de detección para su formato de ensayo específico.
• Tenga en cuenta que la isoforma 2 puede no contener la secuencia del péptido; verifique los perfiles de expresión en su conjunto de muestras (por ejemplo, tejido intestinal normal vs. canceroso) para evitar interpretaciones erróneas.

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