Anticuerpo policlonal anti-DAPP1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q9UN19

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de DAPP1

• DAPP1 (también conocido como BAM32) es una proteína adaptadora de los linfocitos B de aproximadamente 32 kDa.
• Funciona como un adaptador doble para fosfotirosinas y 3-fosfoinosítidos, vinculando la señalización del receptor de antígenos de las células B (BCR) con las vías posteriores de la fosfatidilinositol 3-cinasa (PI3K).
• La proteína contiene un dominio SH2 y un dominio de homología con pleckstrina (PH), lo que permite el reclutamiento a la membrana y la interacción con proteínas.
• DAPP1 se localiza predominantemente en el citoplasma y puede asociarse con la membrana plasmática tras la activación.
• La expresión tisular es más alta en la placenta y los pulmones, con niveles inferiores en el cerebro, el corazón, los riñones, el hígado, el páncreas y el músculo esquelético.
• Se expresa específicamente en los linfocitos B y no se detecta en los linfocitos T ni en células no hematopoyéticas.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación, en concordancia con su función en la señalización.
• El corte y empalme alternativo genera múltiples variantes de transcritos, lo que puede modular su diversidad funcional.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 100–273, una región central de DAPP1; este diseño puede mejorar la detección de DAPP1 de longitud completa, aunque requiere validación de la especificidad para las isoformas.
• Para la transferencia Western, DAPP1 es una proteína citoplasmática asociada a la membrana; utilice tampones de lisis adecuados y considere una centrifugación a baja velocidad para conservar las fracciones de membrana.
• En inmunofluorescencia, la localización en la membrana puede depender del estímulo; deben optimizarse las condiciones de fijación y permeabilización para visualizar tanto las reservas citoplasmáticas como las asociadas a la membrana.
• Para ELISA, el inmunógeno peptídico puede servir como control positivo; sin embargo, se recomienda realizar una titulación y pruebas de reactividad cruzada frente a proteínas similares con dominios SH2/PH.
• La expresión de DAPP1 es específica de las células B; valide el rendimiento del anticuerpo en líneas de linfocitos B (por ejemplo, Ramos y Raji) en lugar de líneas de células T para confirmar la especificidad.

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