Anticuerpo Policlonal Anti-DARS2 para WB, IHC-P, ELISA - Q6PI48

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de DARS2

• DARS2 codifica la aspartil-tRNA sintetasa mitocondrial (AspRS), un miembro de la familia de aminoacil-tRNA sintetasas de clase II fundamental para la síntesis de proteínas mitocondriales.
• Cataliza la unión en dos pasos del aspartato al tRNA(Asp): primero activa el aspartato con ATP para formar Asp-AMP, luego transfiere el aspartato al extremo aceptor del tRNA.
• Se localiza principalmente en la matriz mitocondrial y puede asociarse a la membrana mitocondrial, lo que refleja su papel en la traducción mitocondrial.
• Nombres alternativos incluyen LBSL, ASPRS, mtAspRS y MT-ASPRS; la proteína es la contraparte mitocondrial de la DARS citoplasmática.
• Las mutaciones en DARS2 causan leucoencefalopatía con afectación del tronco del encéfalo y la médula espinal y elevación del lactato (LBSL), lo que la relaciona con la neurodegeneración y la enfermedad de Charcot-Marie-Tooth.
• Se han identificado modificaciones postraduccionales como acetilación, fosforilación y ubiquitinación, que potencialmente regulan la actividad o estabilidad de la enzima.
• La proteína también está anotada con estructura 3D, unión a ATP y enlace isopéptido, lo que resalta su mecanismo catalítico conservado.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno cubre la región C-terminal (aa 406–645), que incluye parte del dominio catalítico; confirma la banda detectada de ~74 kDa en su tipo de muestra y considere la posibilidad de empalme alternativo o procesamiento proteico.
• Para Western blot, optimice la dilución del anticuerpo (por ejemplo, 1:500–1:2000) y use lisados enriquecidos en mitocondrias para aumentar la señal, dada la localización mitocondrial del antígeno.
• En IHC-P, pruebe las condiciones de recuperación de antígeno (por ejemplo, tampón de citrato pH 6,0) e incluya un control sin anticuerpo primario para evaluar la especificidad.
• Para ELISA, combínelo con un anticuerpo secundario conjugado con enzima adecuado y valide la linealidad usando proteína recombinante DARS2 como estándar.

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