Anticuerpo monoclonal de conejo anti-DBH para WB, IP, IF, IHC-P, ELISA - P09172

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la dopamina beta-hidroxilasa

• La dopamina beta-hidroxilasa (DBH), también conocida como dopamina beta-monooxigenasa, es una monooxigenasa que contiene cobre y cataliza la hidroxilación de la dopamina a noradrenalina, un paso fundamental en la biosíntesis de neurotransmisores catecolaminérgicos.
• La enzima se localiza en el lumen de las vesículas secretoras, incluidos los gránulos cromafines de la médula suprarrenal y las vesículas grandes de núcleo denso de las neuronas simpáticas, y también puede secretarse al espacio extracelular.
• La DBH existe como una glucoproteína tetramérica con enlaces disulfuro intermoleculares, lo que contribuye a su estabilidad estructural y función enzimática.
• Requiere iones de cobre y ascorbato (vitamina C) como cofactores para alcanzar su actividad catalítica completa, vinculando su función con el equilibrio redox celular y la homeostasis de metales.
• Las mutaciones en el gen DBH están asociadas con la deficiencia de dopamina beta-hidroxilasa, un trastorno autosómico recesivo poco frecuente caracterizado por hipotensión ortostática, ptosis y deficiencia de noradrenalina.
• La proteína tiene un peso molecular previsto de aproximadamente 69 kDa, con extensas modificaciones postraduccionales, incluida la glucosilación ligada a N.
• La DBH está anclada a las membranas de las vesículas secretoras mediante un segmento transmembrana de anclaje-señal, con la mayor parte de la proteína, incluido el dominio catalítico, orientada hacia el lumen de la vesícula.
• Las palabras clave de UniProt incluyen estructura 3D, biosíntesis de catecolaminas, cobre, variante asociada a enfermedad, glucoproteína y secretada, lo que subraya sus múltiples funciones en la neurobiología y las enfermedades humanas.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 388-617 de la DBH humana, una región que se prevé forma parte del dominio catalítico; por lo tanto, es probable que el anticuerpo reconozca la forma madura y activa de la proteína.
• Para la transferencia Western (WB), considere optimizar la preparación de las muestras utilizando condiciones reductoras y desnaturalizantes, y espere una banda de aproximadamente 69 kDa en lisados celulares o extractos de tejido suprarrenal.
• Este anticuerpo es adecuado para múltiples aplicaciones, incluida la inmunoprecipitación (IP), la inmunofluorescencia (IF/ICC e IF-P) y la inmunohistoquímica (IHC-P); valide empíricamente las diluciones del anticuerpo en el sistema de muestras correspondiente.
• Dada su reactividad cruzada con la DBH de ratón, el anticuerpo puede emplearse en modelos transgénicos o de ratón con inactivación génica para confirmar la especificidad; utilice tejidos de control positivos y negativos adecuados.
• Para ELISA, considere recubrir con proteína DBH recombinante o utilizar un formato tipo sándwich con un anticuerpo de captura/detección emparejado para mejorar la sensibilidad y el rango dinámico.

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