Anticuerpo monoclonal de conejo anti-DBT para WB, IHC-P, IP - P11182

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de DBT

• DBT codifica el componente E2 (lipoamida aciltransferasa) del complejo mitocondrial deshidrogenasa de alfa-cetoácidos de cadena ramificada (BCKD), también conocido como BCKAD-E2 o BCOADC-E2.
• El complejo BCKD cataliza la descarboxilación oxidativa de los alfa-cetoácidos de cadena ramificada (derivados de la leucina, la isoleucina y la valina) para producir acil-CoA y CO₂. Este componente E2 transfiere grupos acilo del componente E1 a la coenzima A.
• DBT se localiza en la matriz mitocondrial, donde participa en el catabolismo de aminoácidos y la producción de energía.
• DBT contiene dominios de unión a lipoilo esenciales para su función de aciltransferasa y sujetos a lipoilación.
• La proteína experimenta modificaciones postraduccionales, incluidas la acetilación y la fosforilación, y se identifica como una fosfoproteína.
• Las mutaciones en DBT están asociadas con la enfermedad de la orina con olor a jarabe de arce (MSUD), un trastorno metabólico autosómico recesivo caracterizado por niveles elevados de aminoácidos de cadena ramificada.
• DBT también se reconoce como el autoantígeno mitocondrial de 52 kDa en la cirrosis biliar primaria, lo que destaca su relevancia inmunológica.
• La proteína está altamente conservada entre las especies de mamíferos, con reactividad cruzada demostrada en humano, ratón y rata.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aminoácidos 62–247) abarca el dominio de unión a lipoilo y parte del núcleo catalítico, lo que puede contribuir a la especificidad del epítopo.
• Para western blot, se espera una banda de aproximadamente 53 kDa; valide con controles adecuados en su sistema de muestras.
• Para inmunohistoquímica (incluida en parafina), puede ser necesaria la recuperación antigénica; optimice las condiciones para su tipo de tejido.
• Se han descrito aplicaciones de inmunoprecipitación y ELISA; considere realizar una titulación para obtener una relación señal-ruido óptima.
• Debido a la alta homología de secuencia entre humano, ratón y rata, se espera reactividad cruzada, pero debe verificarse en su contexto experimental.

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