Anticuerpo policlonal de conejo anti-DDAH1 para WB, IF/ICC y ELISA - O94760

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de DDAH1

• DDAH1 (dimetilarginina dimetilaminohidrolasa 1) es una enzima hidrolasa que hidroliza específicamente la N(G),N(G)-dimetil-L-arginina (ADMA) y la N(G)-monometil-L-arginina (MMA), inhibidores endógenos de la óxido nítrico sintasa (NOS). Esta actividad desempeña un papel fundamental en la regulación de la generación de óxido nítrico (NO).
• El gen DDAH1 experimenta corte y empalme alternativo, generando múltiples isoformas que pueden presentar una expresión específica de tejido o propiedades reguladoras distintas.
• DDAH1 es una proteína de unión a metales que coordina iones de zinc, esenciales para su actividad catalítica y su integridad estructural.
• Las modificaciones postraduccionales de DDAH1 incluyen la acetilación y la S-nitrosilación, que pueden modular su función enzimática y su localización subcelular en respuesta a señales celulares.
• DDAH1 se expresa en niveles detectables en el cerebro, el hígado, los riñones y el páncreas, con una expresión menor en el músculo esquelético, lo que sugiere funciones específicas de tejido en procesos mediados por NO.
• Palabras clave de UniProt: estructura 3D, acetilación, corte y empalme alternativo, secuenciación directa de proteínas, hidrolasa, unión a metales, identificación proteómica, proteoma de referencia, S-nitrosilación, zinc.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es una proteína de fusión recombinante que abarca los aminoácidos 1-285 de DDAH1 humano, correspondientes a una gran región N-terminal. Este diseño suele producir anticuerpos con buena especificidad para la proteína diana.
• Para la transferencia Western, el peso molecular previsto es de 31 kDa. Verifique el tamaño de la banda en lisados de controles positivos, por ejemplo, de cerebro, hígado o riñón humanos, y considere utilizar controles de carga adecuados.
• Para la inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, optimice los protocolos de fijación y permeabilización para lograr una tinción específica y valide los resultados con controles negativos.
• Se ha observado reactividad cruzada con DDAH1 de ratón y de rata; sin embargo, debido a las diferencias de secuencia, se recomienda confirmar el rendimiento utilizando lisados o secciones de tejido de la especie correspondiente.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir la optimización de los tampones de recubrimiento y los sistemas de detección; compruebe el intervalo lineal utilizando proteína DDAH1 recombinante como estándar.

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