Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-DDB2 para WB, IF/ICC, ELISA - Q92466

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de DDB2

• DDB2 (proteína de unión a daños en el ADN 2) es la subunidad de reconocimiento de sustrato del complejo UV-DDB, que detecta lesiones en el ADN inducidas por UV, incluyendo dímeros de pirimidina ciclobutano (CPD), fotoproductos 6-4 (6-4 PP), sitios apurínicos y errores de apareamiento cortos. Referencias relacionadas: PMID:10882109, PMID:11278856, PMID:11705987

• Como parte del complejo ligasa de ubiquitina E3 DCX (DDB1-CUL4-X-box) DDB2-CUL4-ROC1, DDB2 dirige la ubiquitinación de las histonas H2A, H3 y H4 en los sitios de daño, facilitando potencialmente su eliminación de los nucleosomas para promover la reparación. Referencias relacionadas: PMID:12732143, PMID:16473935, PMID:16678110

• La ligasa E3 que contiene DDB2 también ubiquitina la proteína XPC para mejorar la unión al ADN y la NER (reparación por escisión de nucleótidos), y dirige a KAT7/HBO1 para su degradación tras la fosforilación mediada por ATR en la respuesta al daño en el ADN. Referencias relacionadas: PMID:15882621, PMID:26572825

• DDB2 se localiza predominantemente en el núcleo y se asocia con la cromatina, lo que refleja su participación directa en la vigilancia genómica y los procesos de reparación del ADN.

• Expresado ubicuamente, DDB2 muestra los niveles más altos en el endotelio corneal, con múltiples isoformas con empalme alternativo que exhiben patrones de distribución específicos de tejido.

• DDB2 se clasifica bajo palabras clave que incluyen reparación del ADN, daño en el ADN y vía de conjugación Ubl; las mutaciones en DDB2 están relacionadas con el trastorno propenso al cáncer de piel xeroderma pigmentoso (XP) grupo E.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca la región N-terminal (aa 1-315) y puede detectar múltiples isoformas de DDB2; verifique la especificidad de la isoforma comparando los tamaños de las bandas en el western blot.
• Para WB, se espera una banda única de ~48 kDa; incluya controles positivos tratados con UV para monitorear las modificaciones postraduccionales dependientes del daño.
• En aplicaciones de IF/ICC, la tinción nuclear debe ser evidente; la colocalización con marcadores de daño en el ADN (p. ej., γH2AX) puede confirmar el reclutamiento a los sitios de lesión.
• Para ELISA, utilice el inmunógeno recombinante como estándar y evalúe la reactividad cruzada con lisados de ratón y rata, dada la reactividad cruzada de especies confirmada.
• Debido a la participación de DDB2 en las vías de ubiquitinación, considere el uso de inhibidores del proteasoma o inhibidores de desubiquitinasa para estabilizar las formas ubiquitinadas en ciertos diseños experimentales.

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