Anticuerpo policlonal de conejo Anti-DDIT3/CHOP para WB, IHC-P, IP, ELISA - P35638

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de DDIT3/CHOP

• DDIT3 (transcrito 3 inducible por daño del ADN), también denominado CHOP (proteína homóloga a C/EBP), CHOP-10 y GADD153, es un miembro de la familia de factores de transcripción C/EBP que actúa como inhibidor dominante negativo de la transcripción mediada por C/EBP.
• Funciona como mediador central de la respuesta al estrés del retículo endoplásmico (ER), desencadenando la detención del ciclo celular y la apoptosis en diversas condiciones de estrés. Referencias relacionadas: PMID:15322075 PMID:15775988 PMID:19672300
• DDIT3 forma heterodímeros con otras proteínas C/EBP, alterando su capacidad de unión al ADN y reprimiendo la expresión de genes diana.
• Como regulador transcripcional, induce genes proapoptóticos como TRIB3, BBC3/PUMA y BCL2L11/BIM, al mismo tiempo que suprime la expresión de los factores antiapoptóticos BCL2 y MYOD1. Referencias relacionadas: PMID:15775988 PMID:17709599 PMID:20876114 PMID:18940792 PMID:19672300 PMID:20829347
• DDIT3 regula negativamente la vía de señalización canónica Wnt al unirse a TCF7L2/TCF4 y bloquear su actividad transcripcional. Referencias relacionadas: PMID:16434966
• La proteína se desplaza dinámicamente entre el citoplasma y el núcleo, acumulándose en el núcleo después del estrés reticular para organizar los programas de expresión génica.
• DDIT3 sufre modificaciones postraduccionales que incluyen fosforilación y conjugación con proteínas similares a ubiquitina, que pueden modular su actividad y recambio.
• Más allá de la apoptosis, DDIT3 participa en las respuestas inflamatorias al promover la maduración de IL-1β dependiente de caspase-11 (CASP4) y contribuye a la vascularización postnatal mediante la regulación de NOS3.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado para generar este anticuerpo corresponde a la región N-terminal (aminoácidos 1–100) de DDIT3 humano, un dominio que es relativamente conservado; se ha confirmado experimentalmente la reactividad cruzada con ratón y rata, pero debe verificarse la alineación de secuencia para otras especies.
• Para Western blot (WB): detecte una banda de aproximadamente 19 kDa; tenga en cuenta que las modificaciones postraduccionales o las isoformas inducidas por estrés pueden producir bandas adicionales. Optimice el bloqueo y la dilución del anticuerpo para minimizar el fondo, ya que las preparaciones policlonales pueden presentar unión inespecífica.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P): se recomienda la recuperación de antígeno; valide la tinción en secciones de tejido con estrés reticular o apoptótico donde DDIT3 está sobreexpresado.
• Para inmunoprecipitación (IP): el anticuerpo se une a un epitopo de péptido lineal y debe capturar eficazmente el DDIT3 nativo; incluya controles positivos y negativos adecuados para confirmar la especificidad.
• Para ELISA: es adecuado para cuantificar DDIT3 en lisados celulares o muestras de suero; combínelo con un anticuerpo de detección compatible si desarrolla un ensayo tipo sándwich.
• Como anticuerpo policlonal, la consistencia entre lotes puede variar; considere reservar un lote de referencia para estudios a largo plazo.

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