Anticuerpo policlonal de conejo Anti-DEFB4A (Beta-defensina 2) para WB, IF-P, ELISA - O15263

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de DEFB4A (Beta-defensina 2)

• DEFB4A, también conocido como beta-defensina 2 (BD-2, hBD-2), SAP1, DEFB2, DEFB4, DEFB102, es un miembro de la familia de las beta-defensinas de péptidos antimicrobianos.
• Presenta actividad antimicrobiana contra bacterias Gram-negativas y Gram-positivas, con mayor actividad frente a bacterias Gram-negativas (PubMed:10837369, PubMed:9202117). Referencias relacionadas: PMID:10837369, PMID:9202117
• Su actividad antimicrobiana contra P. aeruginosa es sensible a la sal y se reduce en concentraciones altas de sal superiores a 25 mM (PubMed:10837369). Referencias relacionadas: PMID:10837369
• También presenta actividad antifúngica contra C. albicans, permeabilizando las membranas celulares al dirigirse al lípido de la membrana plasmática fosfatidilinositol 4,5-bisfosfato (PIP2) (PubMed:30050988, PubMed:10837369, PubMed:9202117). Referencias relacionadas: PMID:30050988, PMID:10837369, PMID:9202117
• Actúa como ligando para el receptor de quimiocinas C-C CCR6, induciendo la quimiotaxis de células dendríticas inmaduras y células T de memoria (PubMed:10521347, PubMed:20068036). Referencias relacionadas: PMID:10521347, PMID:20068036
• DEFB4A es una proteína secretada, detectable en el líquido del revestimiento epitelial y en los espacios extracelulares.
• Se expresa predominantemente en células epiteliales pulmonares, prepucio, pulmón y tráquea, con menor expresión en riñón, útero y glándula salival (PubMed:10837369, PubMed:9202117, PubMed:9831658). Referencias relacionadas: PMID:10837369, PMID:9202117, PMID:9831658
• Contiene residuos de cisteína conservados que forman enlaces disulfuro intramoleculares, característicos de las defensinas, que contribuyen a la estabilidad estructural y a la función antimicrobiana.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado es un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 1-64 de DEFB4A humana, que cubre la región N-terminal incluyendo el péptido señal. Tenga en cuenta que el anticuerpo puede reconocer las formas precursoras y/o maduras; se recomienda realizar la validación en los sistemas biológicos relevantes.
• Para Western blot (WB), debido al pequeño peso molecular de ~7 kDa, utilice un gel de poliacrilamida de alto porcentaje (por ejemplo, 15% o un gel de gradiente) y optimice cuidadosamente las condiciones de transferencia para evitar una transferencia excesiva. Los controles positivos pueden incluir lisados de células epiteliales pulmonares o traqueales humanas.
• En inmunofluorescencia en secciones embebidas en parafina (IF-P), espere patrones de tinción extracelulares o vesiculares, ya que DEFB4A es una proteína secretada. Se puede ajustar la permeabilización; incluya los controles adecuados.
• Para ELISA, el anticuerpo se puede usar para la detección de DEFB4A nativo o recombinante en fluidos biológicos como lavado broncoalveolar o sobrenadantes de cultivo celular. Se puede explorar el emparejamiento con un anticuerpo de captura para el desarrollo de ELISA sándwich.
• Este anticuerpo es reactivo con DEFB4A humana; la reactividad cruzada con otras especies o miembros de la familia de las defensinas no ha sido probada según los datos disponibles. Valide la especificidad en su sistema de muestra.

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