Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-DGCR8 para WB, ELISA - Q8WYQ5

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de DGCR8

• Codificado por el gen DGCR8 (C22orf12, DGCRK6) en el cromosoma 22, DGCR8 es la subunidad de unión a ARN del complejo microprocesador esencial para el procesamiento de miARN primarios.
• DGCR8 funciona como ancla molecular que reconoce la unión de ARN de doble cadena y ARN de cadena simple de los pri-miARN y dirige a DROSHA para que se escinda precisamente a 11 pares de bases de distancia, generando horquillas de pre-miARN.
  Referencias relacionadas:
  PMID:15531877 PMID:15574589 PMID:15589161 PMID:26027739 PMID:26748718
• La unión del hemo a DGCR8 promueve la dimerización y la formación de un trímero cooperativo que aumenta la actividad de escisión del pri-miARN, mientras que el monómero sin hemo presenta una actividad menor.
• DGCR8 reconoce específicamente las modificaciones de N6-metiladenosina (m6A) en los pri-miARN, un determinante crítico para un procesamiento eficiente.
  Referencias relacionadas:
  PMID:25799998
• Además de la biogénesis de miARN, DGCR8 participa en la reparación de roturas de doble cadena del ADN al facilitar el reclutamiento de RNF168 en los focos de daño del ADN.
  Referencias relacionadas:
  PMID:34188037
• DGCR8 se localiza principalmente en el núcleo y el nucléolo, lo que coincide con sus funciones en el procesamiento de ARN y la estabilidad del genoma.
• La proteína se expresa de forma ubicua y está sujeta a modificaciones postraduccionales que incluyen la fosforilación, la formación de enlaces isopépticos y la conjugación de ubiquitina.

Guía experimental y consejos técnicos

• Al realizar la Western blot, se espera una banda alrededor de 86 kDa; valide la especificidad mediante silenciamiento mediado por siAR o lisados con sobreexpresión de DGCR8.
• Para ELISA, el inmunógeno (aminoácidos 436-764) puede servir como control positivo; considere optimizar las condiciones de recubrimiento y detección en la matriz de muestra correspondiente.
• Verifique la reactividad cruzada en sistemas humanos y de ratón como se indica; para otras especies, realice pruebas empíricas debido a la conservación de la secuencia.
• Dado que DGCR8 participa en complejos proteicos dinámicos, pueden requerirse condiciones nativas o de desnaturalización leve para preservar la accesibilidad del epitopo en aplicaciones basadas en inmunoprecipitación.
• El anticuerpo también puede ser adecuado para inmunohistoquímica o inmunofluorescencia después de la validación; considere métodos de recuperación de antígeno apropiados para proteínas nucleares.

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