Anticuerpo Policlonal Anti-DHX9/ARN Helicasa A para WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q08211

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de DHX9/ARN Helicasa A

• DHX9, también conocida como ARN helicasa A, proteína de caja DEAH 9, leucofisina (LKP) y ADN helicasa nuclear II (NDH II), es una ARN helicasa DEAH-box multifuncional.
• Posee actividad helicasa 3'→5' dependiente de ATP que desenrolla una amplia gama de sustratos, incluyendo ADNdc, ARNdc, híbridos ADN:ARN, horquillas, bucles-D, bucles-R, ADN triplex y cuádruplex-G; requiere una cola monocatenaria 3' para la entrada. Se une a ADNsc, ARNsc, ARN poli(A) y sustratos circulares; estimula la relajación de superenrollamiento mediada por TOP2A. Referencias relacionadas: PMID:1537828 PMID:20669935 PMID:21561811 PMID:24049074 PMID:12711669
• Actúa como un coactivador transcripcional que une la ARN polimerasa II con factores de transcripción (BRCA1, CREBBP, RELA, SMN1) y se une al promotor de CDKN2A. Referencias relacionadas: PMID:11038348 PMID:11149922 PMID:11416126
• Desempeña diversos roles en la regulación génica postranscripcional: coopera con NUP98 en el empalme alternativo, resuelve estructuras dañinas de ARNdc de repeticiones invertidas Alu y facilita la exportación nuclear de ARNm no empalmados que contienen CTE. Referencias relacionadas: PMID:11402034 PMID:16680162 PMID:28221134 PMID:28355180 PMID:10924507 PMID:9162007
• Participa en la traducción de ARNm: mejora la traducción a través de PCE en la UTR 5', estabiliza el ARNm de MYC mediante el complejo mediado por CRD, y estimula la traducción dependiente de colágeno y LIN28A junto con LARP6 y LIN28A. Referencias relacionadas: PMID:16680162 PMID:19029303 PMID:22190748 PMID:21247876
• Funciona como un factor de carga de siRNA para el ensamblaje de RISC y el silenciamiento génico mediado por ARN. Referencias relacionadas: PMID:17531811
• En la inmunidad innata, se une a ARNdc corto derivado de rotavirus y desencadena la activación del inflamasoma NLRP9, lo que conduce a la liberación de IL-18 y piroptosis. Referencias relacionadas: PMID:28636595
• Predominantemente nuclear (nucleoplasma, nucléolo) pero también se localiza en el citoplasma, el centrosoma y el citoesqueleto; está sujeto a extensas modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación, acetilación, metilación y ubiquitinación.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 329–563 de DHX9, una región conservada en humano, ratón y rata; esta secuencia se encuentra dentro del dominio central de la helicasa y se espera que detecte múltiples isoformas.
• Para Western blot, el peso molecular predicho es ~141 kDa. Asegure una transferencia de proteína adecuada y utilice marcadores de peso molecular apropiados. Optimice el bloqueo y la dilución del anticuerpo para su tipo de muestra.
• Para inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, DHX9 se distribuye tanto en compartimentos nucleares como citoplasmáticos. Valide las condiciones de fijación/permeabilización para preservar la accesibilidad del antígeno y considere el uso de tinciones conjuntas para estructuras subcelulares.
• Para inmunoprecipitación, emplee tampones de lisis optimizados que contengan inhibidores de proteasas y fosfatasas para mantener las interacciones proteicas. Un control negativo (por ejemplo, IgG de conejo) es esencial.
• El rendimiento de ELISA debe calibrarse con antígeno purificado o lisados celulares, y la reactividad cruzada con helicasas DEAH-box relacionadas puede evaluarse según los requisitos de especificidad experimental.

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