Anticuerpo monoclonal de conejo anti-DHX9/ARN helicasa A para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q08211

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de DHX9

• DHX9, también conocida como ARN helicasa A, es una helicasa de ácidos nucleicos multifuncional dependiente de ATP que desenrolla tanto el ADN como el ARN en dirección 3' a 5', participando en la replicación del ADN, transcripción, procesamiento de ARN, traducción y silenciamiento génico. Referencias relacionadas: PMID:11416126, PMID:12711669, PMID:15355351

• DHX9 desenrolla diversos sustratos de ácidos nucleicos, incluyendo ADNbc, ARNbc, híbridos ADN:ARN, bucles D, bucles R, G-cuádruplex y ADN triplex, requiriendo una cola monocatenaria 3' para el inicio. Referencias relacionadas: PMID:20669935, PMID:21561811, PMID:24049074

• Como miembro de la familia de helicasas DEAH box, DHX9 actúa como coactivador transcripcional, uniendo la ARN polimerasa II y factores de transcripción como BRCA1, CREBBP, RELA y SMN1, y se une al promotor CDKN2A. Referencias relacionadas: PMID:11038348, PMID:11149922, PMID:11416126

• En la regulación post-transcripcional, DHX9 promueve el empalme (splicing) alternativo, estabiliza el ARNm de MYC a través del complejo CRD y mejora la traducción de ARNm específicos mediante la unión al 5' UTR. Referencias relacionadas: PMID:11402034, PMID:16680162, PMID:28221134, PMID:19029303, PMID:22190748

• DHX9 se localiza predominantemente en el núcleo (nucleoplasma, nucléolo), pero también se desplaza al citoplasma y se asocia con el citoesqueleto y el centrosoma bajo condiciones específicas.

• Las modificaciones post-traduccionales, incluyendo acetilación, metilación, fosforilación y ubiquitinación, modulan la actividad e interacciones de DHX9.

• En infecciones virales, DHX9 actúa como un sensor citosólico de ácidos nucleicos virales y mejora la transcripción, el empalme y la traducción del VIH-1 al unirse al ARN TAR y otros elementos virales. Referencias relacionadas: PMID:20696886, PMID:21957149, PMID:11096080, PMID:9892698, PMID:25149208

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a la región C-terminal (aa 1100–1200) de la DHX9 humana; verifique que el anticuerpo reconozca la DHX9 endógena en el peso molecular esperado de ~141 kDa en su sistema de muestra.
• Para Western blotting, debido al alto peso molecular de DHX9, utilice un gel de acrilamida de bajo porcentaje (p. ej., 6–8%) y asegure condiciones de transferencia adecuadas; incluya controles de carga apropiados.
• Se ha reportado que este anticuerpo reacciona con DHX9 de humano, ratón y rata; sin embargo, los niveles de expresión varían entre tejidos y líneas celulares, por lo que debe optimizar la preparación de la muestra y la dilución del anticuerpo para cada aplicación.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), se recomienda la recuperación de antígeno inducida por calor en tampón citrato (pH 6.0) y el uso de un sistema de detección sensible; valide la especificidad de la tinción con controles adecuados.
• El anticuerpo es adecuado para inmunoprecipitación (IP) y ELISA; considere utilizar el péptido inmunógeno como control positivo y valide el rendimiento del anticuerpo en su configuración experimental específica.

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