Anticuerpo monoclonal de conejo anti-DLAT para WB, ELISA - P10515

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de DLAT

• DLAT codifica el componente dihidrolipoillisina-residuo acetiltransferasa del complejo piruvato deshidrogenasa (PDC-E2). También se conoce como autoantígeno mitocondrial de 70 kDa de la cirrosis biliar primaria (PBC), subunidad de 70 kDa del complejo del antígeno M2 y PDCE2.
• Como parte del complejo piruvato deshidrogenasa (PDH), DLAT cataliza la transferencia de grupos acetilo desde los grupos acetil-lipoilo a la coenzima A, formando acetil-CoA. Esta reacción conecta la glucólisis citoplasmática con el ciclo del ácido tricarboxílico (TCA) mitocondrial.
• El complejo PDH es un gran ensamblaje multienzimático que contiene múltiples copias de tres enzimas: piruvato deshidrogenasa (E1), dihidrolipoamida acetiltransferasa (E2) y dihidrolipoamida deshidrogenasa (E3). DLAT funciona como el componente E2.
• DLAT se localiza en la matriz mitocondrial, donde el complejo PDH está activo.
• La proteína experimenta lip oilación y acetilación, modificaciones postraduccionales esenciales para su función enzimática y regulación.
• DLAT es una transferasa que desempeña un papel clave en el metabolismo de carbohidratos y glucosa, específicamente en el ciclo del TCA.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 548–647 de DLAT humano, una región C-terminal. Tenga en cuenta este diseño antigénico al evaluar la especificidad del epítopo.
• En la transferencia Western, se observa una banda esperada de aproximadamente 69 kDa (peso molecular teórico de aproximadamente 69 kDa). El uso de lisados enriquecidos en mitocondrias puede mejorar la sensibilidad de detección.
• Valide la reactividad en las especies pertinentes: líneas celulares o extractos tisulares humanos, de ratón y de rata. Incluya controles positivos y negativos adecuados.
• Para aplicaciones de ELISA, considere utilizar proteína DLAT recombinante o recubrimiento con péptidos; optimice la dilución del anticuerpo y el sistema de detección para el formato específico de su ensayo.
• Dado que DLAT es una enzima mitocondrial, asegúrese de que los protocolos de preparación de muestras extraigan eficazmente las proteínas mitocondriales.

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