Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-DLAT para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P10515

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de DLAT

• DLAT codifica el componente dihidrolipoamida acetiltransferasa (E2) del complejo piruvato deshidrogenasa (PDH) mitocondrial, que cataliza la conversión de piruvato a acetil-CoA, vinculando la glucólisis y el ciclo de Krebs (Probable).
• El complejo PDH contiene múltiples copias de tres enzimas: E1 (piruvato deshidrogenasa), E2 (dihidrolipoamida acetiltransferasa) y E3 (dihidrolipoamida deshidrogenasa). DLAT constituye el núcleo E2, aceptando grupos acetilo del componente lipoílico de E1 y transfiriéndolos a la coenzima A para formar acetil-CoA (Probable).
• Los alias conocidos para DLAT incluyen PDC-E2, PDCE2, DLTA, E2 y CBP, este último reflejando su identificación como el principal autoantígeno en la cirrosis biliar primaria (subunidad 70 kDa del complejo antigénico M2).
• Subcelularmente, DLAT se localiza en la matriz mitocondrial, como lo indica su anotación de LOCALIZACIÓN SUBCELULAR y la presencia de un péptido de tránsito mitocondrial.
• Modificaciones postraduccionales como acetilación, lipoilación y fosforilación se señalan en las palabras clave de UniProt, destacando la compleja regulación del complejo PDH.
• La identificación proteómica y el estado de proteoma de referencia confirman la detección robusta de DLAT en estudios proteómicos, consistente con su papel como enzima metabólica clave.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno cubre los aminoácidos 87-270, que incluyen el dominio de unión a lipoílico; por lo tanto, se espera que este anticuerpo detecte tanto DLAT nativo como recombinante. Para WB, el tamaño de banda esperado es aproximadamente 69 kDa; el uso de muestras enriquecidas en mitocondrias puede mejorar la especificidad de la señal.
• En IF/ICC, se anticipa tinción mitocondrial; se recomienda la co-localización con marcadores de orgánulos (por ejemplo, MitoTracker) para su validación.
• El anticuerpo es reactivo de forma cruzada con ratón y rata; verifique la homología de secuencia en la región del inmunógeno si la detección específica de especie es crítica.
• Para IHC-P, considere la recuperación de antígeno y la optimización de la dilución. Utilice tejidos de control positivo que expresen altos niveles de DLAT (por ejemplo, hígado, corazón) para confirmar la reactividad.
• Para ELISA, asegúrese de que la proteína recombinante o el péptido antigénico coincida con la secuencia del inmunógeno para evitar el enmascaramiento del epítopo.

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