Anticuerpo policlonal de conejo anti-DNASE1 para WB, IF/ICC, ELISA - P24855

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: función y localización de DNASE1

• DNASE1 (desoxirribonucleasa I) es una endonucleasa sérica secretada producida por diversos órganos exocrinos y endocrinos. Escinde preferentemente el ADN libre de proteínas y se ha relacionado con la apoptosis (PubMed:11241278, 2251263, 2277032).
  Referencias relacionadas: PMID:11241278 PMID:2251263 PMID:2277032

• Se une específicamente a la G-actina y bloquea la polimerización de la actina (por similitud).

• Junto con DNASE1L3, desempeña un papel clave en la degradación de las trampas extracelulares de neutrófilos (NET), estructuras basadas en ADN liberadas por los neutrófilos para atrapar patógenos (por similitud). Esta degradación ayuda a prevenir la oclusión vascular y el daño orgánico inducidos por las NET durante la inflamación (por similitud).

• La proteína es una endonucleasa dependiente del calcio; está N-glucosilada y contiene enlaces disulfuro (según las palabras clave de UniProt). El corte y empalme alternativo genera múltiples isoformas.

• La localización subcelular incluye la vía secretora, los gránulos de zimógeno y la envoltura nuclear.

• DNASE1 se expresa en mayor medida en los tejidos del sistema digestivo, con niveles abundantes en la orina, el semen y la saliva (según la sección de ESPECIFICIDAD TISULAR).

• Como diana farmacéutica, está asociada con el lupus eritematoso sistémico (LES) y se utiliza terapéuticamente para eliminar el ADN en la fibrosis quística (según las palabras clave).

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado es una proteína de fusión recombinante correspondiente a los aminoácidos 30–235 de la DNASE1 humana, que cubre una gran parte de la proteína madura secretada. Esta amplia cobertura de epítopos aumenta la probabilidad de reconocer las formas nativas y desnaturalizadas.
• Para el Western blot (WB), se espera una banda cercana a 31 kDa; el usuario final debe optimizar las diluciones de trabajo.
• Para la inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), se recomienda considerar el uso de agentes de permeabilización, ya que DNASE1 es principalmente secretada y puede requerir la permeabilización de la membrana celular para su detección.
• Se observó reactividad cruzada con ratón y rata; por lo tanto, este anticuerpo puede ser adecuado para estudios con modelos de roedores. Sin embargo, se recomienda validarlo en el sistema de muestras específico.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir probar diferentes concentraciones de anticuerpo y condiciones de recubrimiento; no se proporciona un protocolo fijo.
• Este anticuerpo policlonal, producido en conejo, puede presentar variabilidad entre lotes; incluya siempre los controles adecuados.

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