Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-DNMT1 para WB, IHC-P, IP, ELISA - P26358

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de DNMT1

• Identidad de la Proteína e Isoformas: DNMT1 (ADN (citosina-5)-metiltransferasa 1) es una proteína de dedo de zinc tipo CXXC con los alias MCMT, CXXC9 y ADN metiltransferasa HsaI. Existen múltiples isoformas; la isoforma 2 se expresa menos que la isoforma canónica 1.
• Mantenimiento de la Metilación del ADN: Funciona como la principal ADN metiltransferasa de mantenimiento, metilando preferentemente sitios CpG hemi-metilados para preservar los patrones de metilación durante la replicación del ADN. Se asocia con focos de replicación en la fase S. Referencias relacionadas: PMID:17200670, PMID:21745816, PMID:26070743
• Asociación con la Cromatina durante el Ciclo Celular: Además de la asociación en fase S, DNMT1 se une a la cromatina durante las fases G2 y M, contribuyendo al mantenimiento de la metilación del ADN independiente de la replicación. Referencias relacionadas: PMID:21745816
• Represión Transcripcional: Media la represión transcripcional a través de la interacción directa con HDAC2, y coordina la metilación del ADN con modificaciones de histonas para regular la expresión génica. Referencias relacionadas: PMID:10888872, PMID:16357870
• Doble Función en Silenciamiento y Activación Génica: Forma complejos correpresores que promueven la hipermethylación mediada por KRAS y el silenciamiento de genes supresores de tumores en células de cáncer colorrectal; también mantiene estados de cromatina represivos en células madre embrionarias. Por el contrario, puede participar en la activación génica (p. ej., BAG1) mediante la modulación de la dimetilación de histona H3K4 y H3K9 en complejo con DNMT3B y CTCFL/BORIS. Referencias relacionadas: PMID:24623306, PMID:18413740
• Localización Subcelular y Expresión Tisular: Predominantemente nuclear, asociada con cromosomas. Expresada de manera ubicua; muy abundante en tejidos fetales, corazón, riñón, placenta y células mononucleares de sangre periférica, con niveles más bajos en bazo, pulmón, cerebro, intestino delgado, colon, hígado y músculo esquelético.
• Modificaciones Postraduccionales y Asociaciones con Enfermedades: Sujeta a acetilación, fosforilación y ubiquitinación. Las mutaciones en DNMT1 están vinculadas a neuropatía sensorial hereditaria y ataxia cerebelosa autosómica dominante, sordera y narcolepsia (ADCADN).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 1–100 en el extremo N-terminal de DNMT1 humano; considere usar un ensayo de bloqueo con péptido para confirmar la especificidad si es necesario.
• Para Western blot, el peso molecular predicho es de ~183 kDa. Utilice un gel de acrilamida de bajo porcentaje (p. ej., 6–8%) y optimice las condiciones de transferencia para proteínas de alto peso molecular.
• En IHC-P, realice una recuperación antigénica apropiada y valide la tinción utilizando controles de tejido positivo y negativo (p. ej., corazón, placenta o colon).
• Se informa que el anticuerpo tiene reactividad cruzada con muestras de humano, ratón y rata. Al extender su uso a otras especies, verifique la reactividad experimentalmente.
• Para inmunoprecipitación y ELISA, siga los protocolos estándar e incluya controles adecuados para tener en cuenta la posible unión inespecífica.

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