Anticuerpo Policlonal Anti-DNMT1 de Conejo para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P26358

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de DNMT1

• DNMT1, también conocida como ADN metiltransferasa HsaI, MCMT o CXXC9, es una proteína nuclear de ~183 kDa que actúa como la principal ADN metiltransferasa de mantenimiento en humanos.
• Metila preferentemente dinucleótidos CpG heminetilados y se asocia con los focos de replicación del ADN durante la fase S para copiar fielmente los patrones de metilación en la cadena recién sintetizada, asegurando la herencia epigenética. Referencias relacionadas: PMID:17200670, PMID:21745816, PMID:26070743
• Durante las fases G2 y M, DNMT1 permanece asociada a la cromatina para mantener la metilación independientemente de la replicación, preservando así las marcas de metilación genómica a lo largo del ciclo celular. Referencias relacionadas: PMID:21745816
• DNMT1 también media la represión transcripcional al unirse directamente a HDAC2 y puede coordinar la metilación del ADN con modificaciones de histonas, como la dimetilación de H3K9, junto con DNMT3B y CTCFL. Referencias relacionadas: PMID:10888872, PMID:18413740
• Forma un complejo correpresor que facilita la hipermethylación impulsada por KRAS y el silenciamiento de genes supresores de tumores en el cáncer colorrectal, y de manera similar mantiene la represión de genes del desarrollo en células madre embrionarias. Referencias relacionadas: PMID:24623306
• Expresada de forma ubicua con los niveles más altos en tejidos fetales, corazón, riñón y placenta; la isoforma 2 es menos abundante. Se localiza en el núcleo y los cromosomas, y contiene dominios característicos de dedo de zinc CXXC (Palabras clave: splicing alternativo, dedo de zinc).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El anticuerpo se generó contra un fragmento N-terminal (aa 1-124) de DNMT1; por lo tanto, se espera que reconozca DNMT1 de longitud completa y posiblemente productos de truncamiento N-terminal.
• Al realizar western blot, utilice un gel de SDS-PAGE al 6-8% y asegure una transferencia eficiente debido al gran tamaño de DNMT1 (~183 kDa).
• Para inmunohistoquímica e inmunofluorescencia, puede ser necesaria la permeabilización nuclear; considere validar la especificidad de la tinción con controles de knockdown o knockout de DNMT1.
• El anticuerpo presenta reactividad cruzada con DNMT1 de ratón y rata, pero los usuarios deben verificar el rendimiento en cada especie y tipo de tejido dada la expresión ubicua pero variable.
• Como anticuerpo policlonal, puede presentar variabilidad entre lotes; incluya un control de carga y estándares de referencia interna para ensayos cuantitativos.

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