Anticuerpo policlonal de conejo Anti-DOG-1/TMEM16A para WB, ELISA - Q5XXA6

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de DOG-1/TMEM16A

• ANO1 codifica la anoctamina-1, un canal de cloruro activado por calcio (CaCC) que desempeña un papel central en el transporte de aniones transepitelial y la contracción del músculo liso. Referencias relacionadas: PMID:20056604, PMID:22178883, PMID:22946059
• El canal es indispensable para la actividad marcapaso de las células intersticiales de Cajal (ICC) en el tracto gastrointestinal, por lo que regula la motilidad intestinal.
• En las células epiteliales de las vías aéreas, ANO1 contribuye sustancialmente a la conductancia de cloruro basal y estimulada, y es fundamental para el desarrollo del cartílago traqueal.
• Facilita la activación de CFTR y la expresión en membrana al aumentar la liberación de almacenes de Ca²⁺ del retículo endoplásmico, lo que pone de relieve su papel en el transporte de cloruro relacionado con la fibrosis quística. Referencias relacionadas: PMID:28963502
• ANO1 regula la expresión de moco en las vías aéreas inducida por las interleucinas IL3 e IL8 a través de la proteína asociada al asma CLCA1, aumentando la regulación de MUC5AC; sin embargo, existe evidencia contradictoria que indica que la expresión de MUC5AC puede no requerir ANO1 en determinados contextos. Referencias relacionadas: PMID:33026825, PMID:31732694
• El empalme alternativo genera isoformas con distintas sensibilidades al calcio y permeabilidades al cloruro, incluyendo una variante epitelial de la glándula sudorípara con mayor permeabilidad basal al Cl⁻ y una isoforma hiper sensible.
• La proteína se localiza predominantemente en la membrana plasmática apical y los compartimentos presinápticos, con una expresión tisular amplia que incluye hígado, músculo esquelético, músculo liso gastrointestinal, conductos colectores renales, epitelio nasal y glándulas sudoríparas ecrinas.
• Las modificaciones postraduccionales, como la glicosilación, la formación de enlaces disulfuro y la fosforilación, son fundamentales para el tráfico y la regulación funcional de la anoctamina-1.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para la transferencia western, se espera una banda de aproximadamente 114 kDa en condiciones reductoras y desnaturalizantes; valide el resultado usando lisados de control positivo de tejidos humanos o de ratón que se sabe expresan ANO1, como el músculo liso gastrointestinal o el epitelio de las vías aéreas.
• El inmunógeno (aa 40–210) corresponde a la región N-terminal; la detección de ciertas isoformas de empalme puede variar, por lo que verifique el reconocimiento específico de la isoforma si es necesario.
• Al realizar ELISA, titule el anticuerpo para determinar las concentraciones de trabajo óptimas y confirme la especificidad frente a la proteína ANO1 recombinante o lisados de células con sobreexpresión.
• Como anticuerpo policlonal, es posible que exista variabilidad entre lotes; incluya los controles adecuados y considere la absorción cruzada si se observan bandas no específicas.
• La reactividad cruzada está verificada para humano y ratón; para otras especies, realice una alineación de secuencias de la región del inmunógeno y pruebas piloto.

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