Anticuerpo policlonal de conejo anti-dopamina beta-hidroxilasa (DBH) para WB, ELISA - P09172

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la DBH

• La DBH (dopamina beta-hidroxilasa) es una monooxigenasa que contiene cobre y cataliza la conversión de dopamina en noradrenalina, un paso clave en la biosíntesis de catecolaminas.
• También se conoce como dopamina beta-monooxigenasa y pertenece a la familia de las monooxigenasas dependientes de ascorbato de tipo II de cobre.
• La enzima requiere vitamina C (ascorbato) como cofactor y oxígeno molecular para su actividad catalítica.
• La DBH se localiza principalmente dentro de las vesículas secretoras, incluidos los gránulos cromafines de la médula suprarrenal y las vesículas de núcleo denso grande en las neuronas, donde se encuentra tanto en forma soluble como asociada a la membrana.
• La proteína es una glucoproteína con enlaces disulfuro y una única hélice transmembrana, lo que indica su anclaje a la membrana vesicular.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la glicosilación, y contiene varios sitios de unión al cobre esenciales para la función enzimática.
• La DBH es detectable en suero y líquido cefalorraquídeo debido a su secreción por células neuroendocrinas, y su actividad se utiliza a menudo como marcador de la función del sistema nervioso simpático.
• El gen humano de la DBH codifica una proteína de 69 kDa (calculada) y se expresa altamente en neuronas adrenérgicas y en la médula suprarrenal.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para Western blotting, considere probar un rango de diluciones de anticuerpo (p. ej., 1:500–1:2000) para optimizar la señal. El inmunógeno se deriva de la región N-terminal (aa1-200), por lo que debe tener en cuenta la accesibilidad del epítopo si utiliza condiciones desnaturalizantes frente a no desnaturalizantes.
• Valide la reactividad del anticuerpo en tejidos humanos, de ratón y de rata relevantes, ya que se espera reactividad cruzada basada en la homología de secuencia en la región del inmunógeno.
• Para ELISA, se puede emplear el recubrimiento directo del antígeno peptídico o de la proteína DBH recombinante. Realice un experimento piloto para determinar la concentración de recubrimiento y la dilución de anticuerpo óptimas.

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