Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Dopamina beta Hidroxilasa para WB y ELISA - P09172

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Dopamina beta-Hidroxilasa

• Identidad de la proteína: La Dopamina beta-hidroxilasa (DBH), también conocida como dopamina beta-monooxigenasa, está codificada por el gen DBH en humanos y pertenece a la familia de monooxigenasas dependientes de ascorbato de cobre tipo II.
• Función principal: DBH cataliza la hidroxilación de la dopamina a noradrenalina (norepinefrina), un paso fundamental en la vía de biosíntesis de catecolaminas, regulando así el equilibrio de neurotransmisores.
• Familia génica: DBH es miembro de la familia de las monooxigenasas; no se describen parálogos estrechamente relacionados dentro del genoma humano, lo que destaca su papel único en la producción de catecolaminas.
• Localización subcelular: DBH se localiza principalmente en el lumen y la membrana de vesículas secretoras, notablemente en los gránulos cromafines, pero también puede secretarse al espacio extracelular tras la exocitosis.
• Modificaciones postraduccionales y cofactores: Como glicoproteína, DBH sufre una extensa N‑glicosilación, contiene enlaces disulfuro esenciales para su estabilidad estructural y requiere iones de cobre y vitamina C (ascorbato) como cofactores para su actividad oxidorreductasa.
• Peso molecular: El peso molecular calculado del precursor no glicosilado es de aproximadamente 69.065 Da, consistente con la banda de ~69 kDa observada en SDS‑PAGE en condiciones reductoras.
• Asociaciones con enfermedades: Las variaciones genéticas y mutaciones en DBH se han relacionado con hipotensión ortostática y otros trastornos, subrayando su relevancia clínica (indicado por la palabra clave "Variante de enfermedad" en UniProtKB).
• Notas adicionales: DBH también se identifica como una proteína secretada y una entrada de proteoma de referencia, con su estructura 3D determinada y datos de secuenciación directa de proteínas disponibles, lo que refuerza su caracterización bioquímica.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Aplicación en Western blot: El anticuerpo detecta una banda alrededor de 69 kDa en muestras humanas; considere usar condiciones reductoras y validar la señal en tejidos o tipos celulares conocidos por expresar DBH, como la médula suprarrenal o neuronas simpáticas.
• Diseño del inmunógeno: El fragmento recombinante que abarca los aminoácidos 100–250 corresponde a una región conservada dentro del dominio catalítico. El anticuerpo puede reconocer tanto la forma luminal madura como cualquier precursor asociado a membrana si está presente en el lisado.
• Consideraciones para ELISA: Al desarrollar inmunoensayos tipo sándwich, pruebe la compatibilidad de emparejamiento con un anticuerpo de captura adecuado. Tenga en cuenta que DBH se secreta; por lo tanto, una selección cuidadosa del tipo de muestra (por ejemplo, plasma, medio condicionado) y pasos de pre‑incubación pueden mejorar la detección.
• Reactividad cruzada: Si bien está documentado que el anticuerpo reacciona con DBH humana, la posible reactividad cruzada con otras especies o isoformas de DBH debe verificarse de forma independiente, especialmente si se pretenden aplicaciones cuantitativas.
• Preparación de la muestra: Debido a la doble localización de DBH en membranas y lúmenes vesiculares, pueden requerirse estrategias de solubilización (por ejemplo, detergentes suaves) o fraccionamiento subcelular para lograr una señal óptima en ensayos en fase sólida.

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