Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-DR5/TRAILR2/TNFRSF10B para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O14763

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de DR5/TRAILR2/TNFRSF10B

• DR5 (Receptor de muerte 5), también denominado TRAILR2 y CD262, es un miembro de la superfamilia de receptores del factor de necrosis tumoral (TNFRSF) codificado por el gen TNFRSF10B. Es un mediador clave de la apoptosis extrínseca.
• DR5 actúa como receptor del ligando citotóxico TNFSF10/TRAIL. La unión al ligando recluta a FADD y a la caspa-8 para formar el complejo de señalización inductora de muerte (DISC), lo que conduce a la activación de caspasas y a la muerte celular programada. Referencias relacionadas: PMID:10549288
• Más allá de la apoptosis, DR5 puede activar NF-κB, lo que sugiere roles adicionales en la inflamación y la supervivencia celular.
• DR5 es una glicoproteína transmembranal localizada principalmente en la superficie celular, que presenta un péptido señal, repeticiones extracelulares ricas en cisteína y un dominio de muerte citoplasmático.
• La proteína se expresa de forma amplia en tejidos humanos, con una notable acumulación en líneas celulares tumorales (por ejemplo, HeLaS3, K-562, SW480) y órganos como el corazón, el hígado y el páncreas; no es detectable en el cerebro.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación N-ligada y formación de enlaces disulfuro, probablemente esenciales para la estabilidad y función del receptor.
• El empalme alternativo de TNFRSF10B genera múltiples variantes de transcritos, que pueden producir isoformas con propiedades regulatorias diferentes.

Guía experimental y consejos técnicos

• El anticuerpo se obtuvo contra un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 341-440 del DR5 humano. Esta región se encuentra en el dominio intracelular; por lo tanto, se espera que el anticuerpo detecte tanto la variante de longitud completa como cualquier variante truncada en el extremo C en aplicaciones que requieren acceso intracelular.
• Para Western blot (WB), se anticipa una banda de aproximadamente 48 kDa en condiciones reductoras. Se recomienda el uso de inhibidores de proteasas durante la lisis para evitar la degradación.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), la recuperación de antígeno con tampón de citrato (pH 6) o EDTA (pH 9) puede mejorar la exposición del epitopo; las condiciones óptimas deben determinarse experimentalmente.
• Para tinción de inmunofluorescencia (IF/ICC), se recomienda la permeabilización celular (por ejemplo, con 0,1% de Triton X-100) para permitir que el anticuerpo penetre hasta el epitopo intracelular.
• La reactividad cruzada informada con ratón y rata implica homología de secuencia en la región del inmunógeno; sin embargo, la intensidad de la señal puede variar, por lo que se debe validar en los sistemas modelo relevantes.
• Como reactivo listo para ELISA, este anticuerpo se puede usar para captura o detección en inmunoensayos sándwich: realice una titulación contra la proteína DR5 recombinante para obtener el mejor rendimiento.

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