Anticuerpo policlonal de conejo anti-DR5/TRAILR2/TNFRSF10B para WB y ELISA - O14763

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de DR5/TRAILR2/TNFRSF10B

• DR5/TRAILR2/TNFRSF10B es un miembro de la superfamilia de receptores del factor de necrosis tumoral, también conocido como receptor de muerte 5 (DR5), KILLER y TRAIL-R2. Está codificado por el gen TNFRSF10B en el cromosoma 8p21.3.
• El receptor se une al ligando citotóxico TNFSF10/TRAIL, desencadenando apoptosis a través del reclutamiento del adaptador FADD y la caspasa-8 para formar el complejo de señalización inductor de muerte (DISC). Referencias relacionadas: PMID:10549288
• Tras la formación del DISC, la caspasa-8 se activa proteolíticamente, iniciando una cascada de caspasas que ejecutan la apoptosis. La señalización mediada por DR5 también activa NF-kB, vinculándola a vías de supervivencia.
• DR5 es esencial para la apoptosis inducida por estrés del retículo endoplásmico, destacando su papel en las respuestas al estrés celular.
• La proteína es una glicoproteína transmembrana de tipo I localizada en la membrana plasmática. Contiene dominios extracelulares característicos ricos en cisteína y un dominio de muerte citoplasmático.
• DR5 se expresa ampliamente en tejidos adultos y fetales, con una expresión particularmente alta en líneas celulares tumorales (p. ej., HeLa, K-562, HL-60, SW480, A-549, G-361) y en corazón, hígado, páncreas, bazo, timo, próstata, ovario, útero, placenta y tracto intestinal; no es detectable en el cerebro.
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas, y la proteína sufre modificaciones postraduccionales que incluyen glicosilación y formación de enlaces disulfuro, críticas para la estabilidad del receptor y la unión al ligando.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno utilizado para este anticuerpo policlonal corresponde a los aminoácidos 260-440 de DR5/TRAILR2/TNFRSF10B humano, que abarca el dominio de muerte intracelular y parte de la región citoplasmática. Este diseño puede ser adecuado para detectar tanto las formas completas como las escindidas del receptor.
• Dada la especificidad para DR5 humano, los experimentadores deben validar la reactividad cruzada si utilizan muestras no humanas; el producto está confirmado para reactividad humana.
• Para Western blot (WB), las líneas celulares con alta expresión de DR5 (p. ej., HeLa, K-562, SW480) pueden servir como controles positivos, mientras que los tejidos cerebrales pueden ser negativos. Considere usar condiciones de lisis y reductoras apropiadas para observar la banda de ~48 kDa.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir la optimización de las condiciones de recubrimiento y el sistema de detección debido a la localización membranal del receptor; se pueden explorar proteínas DR5 recombinantes o lisados celulares como dianas de captura.
• Dado que DR5 sufre empalme alternativo y glicosilación, en algunas muestras pueden observarse múltiples bandas o un manchado. El uso de enzimas desglicosilantes o la confirmación mediante silenciamiento con siRNA pueden ayudar a validar la identidad de la banda.

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