Anticuerpo policlonal anti-DSPP para WB, ELISA - Q9NZW4

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la DSPP

• La dentina sialofosfoproteína (DSPP) es una proteína de la matriz extracelular secretada que se expresa predominantemente en los dientes, donde es sintetizada por los odontoblastos y, de forma transitoria, por los preameloblastos.
• La DSPP se procesa proteolíticamente en dos subunidades funcionales: sialoproteína de la dentina (DSP) y fosfoproteína de la dentina (DPP). La DSP promueve la dentinogénesis, mientras que la DPP se une a altas concentraciones de calcio, facilita la mineralización inicial del colágeno de la dentina y regula el tamaño y la forma de los cristales.
• Pertenece a la familia SIBLING (ligando de unión a integrina pequeña, glicoproteína ligada a N), un grupo de fosfoproteínas ácidas críticas para la biomineralización.
• Su ubicación subcelular es el espacio extracelular y la matriz extracelular de la dentina y el hueso.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación ligada a N y O, sialilación y una extensa fosforilación de serina/ácido aspártico, lo que le confiere un carácter altamente ácido esencial para las interacciones con el calcio.
• Las mutaciones en DSPP están asociadas con la dentinogénesis imperfecta y la pérdida auditiva neurosensorial no sindrómica autosómica dominante (DFNA39), lo que subraya su papel en el desarrollo de la dentina y el sistema auditivo.
• Palabras clave: Biomineralización, Calcio, Sordera, Variante de enfermedad, Matriz extracelular, Glicoproteína, Fosfoproteína, Proteoma de referencia, Secretado, Señal.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región DSP (aminoácidos 16-146); por lo tanto, el anticuerpo reconoce principalmente la DSP, pero también puede detectar el precursor de longitud completa dependiendo del contexto de la muestra.
• Para Western blot, espere bandas de ~95 kDa (DSP), ~45-55 kDa (fragmentos de DPP) y/o la proteína de longitud completa de ~131 kDa; valide los tamaños con marcadores de peso molecular y controles positivos adecuados.
• Utilice lisados derivados de dientes, osteoblastos u odontoblastos como controles positivos; para la detección entre especies, verifique con extractos de tejido dental de ratón o rata.
• Para ELISA, recubra las placas con DSPP recombinante o un péptido sintético que contenga la secuencia del inmunógeno y optimice las condiciones de recubrimiento y bloqueo.
• Como anticuerpo policlonal, considere pasos de bloqueo adicionales (por ejemplo, leche desnatada al 5% o BSA) y la titulación del anticuerpo secundario para minimizar la unión inespecífica.
• Incluya siempre un control sin anticuerpo primario para confirmar la especificidad de la señal.

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