Anticuerpo monoclonal de conejo anti-cadena intermedia 1 de dineína para WB, ELISA - Q9UI46

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la cadena intermedia 1 de dineína

• El gen DNAI1 codifica la cadena intermedia 1 de dineína axonemal, una proteína que contiene repeticiones WD y que actúa como un componente estructural y funcional fundamental del complejo del brazo externo de dineína en cilios y flagelos móviles.
• Esta proteína es esencial para el movimiento ciliar a lo largo de los microtúbulos, generando la fuerza necesaria para la depuración mucociliar en el tracto respiratorio y para la motilidad espermática.
• Se producen múltiples isoformas proteicas mediante corte y empalme alternativo, lo que puede contribuir a la regulación específica de cada tejido del ensamblaje y la función de la dineína en diferentes tipos de células ciliadas.
• A nivel proteico, DNAI1 se expresa predominantemente en las células epiteliales ciliadas del tracto respiratorio, en consonancia con su función de proteger las vías respiratorias frente a la acumulación de patógenos y partículas.
• A nivel subcelular, DNAI1 se localiza a lo largo de todo el axonema de cilios y flagelos, anclada a los microtúbulos del doblete externo como parte del complejo motor de dineína.
• Las mutaciones en DNAI1 están asociadas con la discinesia ciliar primaria (PCD) y el síndrome de Kartagener, trastornos caracterizados por infecciones respiratorias crónicas, situs inversus e infertilidad masculina debido a cilios y espermatozoides inmóviles.
• Las modificaciones postraduccionales, particularmente la fosforilación, regulan la actividad de la dineína y la dinámica axonemal, aunque los sitios de modificación precisos en DNAI1 aún no se han cartografiado por completo.
• La región N-terminal contiene dominios de repetición WD40 que median las interacciones proteína-proteína esenciales para la integridad del complejo de dineína y la generación de fuerza motora.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para la detección mediante Western blot, prepare lisados de líneas celulares epiteliales ciliadas o tejidos para confirmar la expresión endógena; se espera una banda de aproximadamente 79 kDa.
• Utilice condiciones estándar de SDS-PAGE (por ejemplo, un gel al 8-10 %) y optimice la transferencia para proteínas de alto peso molecular con el fin de garantizar una detección eficiente.
• Dado que el inmunógeno abarca los aminoácidos N-terminales 1-200, el anticuerpo puede reconocer múltiples isoformas; valide la especificidad mediante controles de silenciamiento o eliminación génica, si están disponibles.
• Para aplicaciones de ELISA, recubra la placa con el inmunógeno recombinante o la proteína purificada y titule el anticuerpo para establecer una concentración de trabajo adecuada.
• Debido a que se ha informado de reactividad cruzada con ratón y rata, este anticuerpo puede considerarse para estudios en estas especies, pero se recomienda una optimización adecuada del protocolo específica para cada especie.

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