Anticuerpo Policlonal Anti-Distonina (DST) para WB, ELISA - Q03001

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Distonina

• La distonina (DST), también conocida como antígeno 1 del penfigoide ampolloso (BPAG1) o antígeno de penfigoide ampolloso de 230/240 kDa, es una gran proteína de unión del citoesqueleto perteneciente a la familia de las placinas. Se generan múltiples isoformas mediante el uso de promotores alternativos y empalme, con la isoforma 1 expresada en mioblastos, la isoforma 3 en la piel y la isoforma 6 en el cerebro.
• La distonina integra redes de filamentos intermedios, actina y microtúbulos del citoesqueleto. Ancla los filamentos intermedios que contienen queratina a los hemidesmosomas en las células epiteliales, desempeñando un papel estructural en el ensamblaje de hemidesmosomas y la regulación de la polaridad y motilidad de los queratinocitos a través de la señalización ITGB4-RAC1.
• En células neurales y musculares, la DST es necesaria para anclar los filamentos intermedios al citoesqueleto de actina y para agrupar los filamentos de actina alrededor del núcleo. También regula la organización y estabilidad de la red de microtúbulos en las neuronas sensoriales para apoyar el transporte axonal.
• La localización subcelular es muy diversa: la distonina se encuentra en hemidesmosomas, el citoplasma, fibras de estrés, corteza celular, axones, líneas Z y zonas H sarcoméricas, envoltura nuclear y membrana del retículo endoplásmico, lo que refleja sus funciones multifacéticas de unión.
• Las modificaciones postraduccionales y características estructurales clave incluyen la unión a calcio, regiones de hélice superenrollada, dominio SH3 y un dominio CH; es una fosfoproteína, una lipoproteína palmitoilada y contiene enlaces isopeptídicos. También tiene regiones transmembrana y está involucrada en la conjugación de ubiquitina.
• La expresión específica de tejido resalta su papel en músculo, piel y tejidos neuronales: altamente expresada en músculo esquelético y queratinocitos cultivados, con isoformas distintas que contribuyen a la organización del citoesqueleto específica del tejido y a la integridad mecánica.
• Las mutaciones en DST se asocian con epidermólisis ampollosa simple y neuropatía sensorial y autonómica hereditaria tipo 6, subrayando su papel crítico en el mantenimiento de la resistencia tisular.
• Funciones adicionales incluyen mediar el acoplamiento del complejo motor dineína/dinactina a las cargas vesiculares para el transporte axonal retrógrado a través de interacciones con TMEM108 y DCTN1, vinculando el citoesqueleto al tráfico intracelular.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es una proteína de fusión recombinante correspondiente a los 270 aminoácidos del extremo N-terminal de la DST humana (NP_001714.1). Para Western blot, considere que la distonina de longitud completa es extremadamente grande (~861 kDa), así que asegure condiciones de gel apropiadas (por ejemplo, bajo porcentaje de acrilamida) y tiempos de transferencia prolongados. También puede ocurrir la detección de isoformas más pequeñas.
• Para aplicaciones de ELISA, valide las condiciones de recubrimiento y la titulación del anticuerpo utilizando proteína recombinante o lisados celulares de las especies relevantes (humano, ratón, rata). Debido a su naturaleza policlonal, se debe evaluar la consistencia entre lotes si se utiliza para ensayos cuantitativos.
• Se especifica la reactividad cruzada con ratón y rata; sin embargo, confirme la expresión endógena en los tejidos o líneas celulares objetivo, ya que las isoformas de distonina varían. Los niveles endógenos pueden ser bajos en algunas líneas celulares de uso común.

CamelBio: Su Puente de Abastecimiento Integral

CamelBio proporciona a los fabricantes de diagnósticos y laboratorios de investigación un acceso simplificado a materias primas para IVD, incluidos anticuerpos validados para dianas del citoesqueleto y adhesión como la distonina. Más allá de este anticuerpo policlonal, ofrecemos un abastecimiento integral para pares de anticuerpos emparejados, alternativas monoclonales optimizadas, reactivos auxiliares a granel y adquisición de dianas raras para apoyar el desarrollo de su ensayo desde el concepto hasta la clínica.