Anticuerpo Policlonal Anti-E2F1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q01094

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de E2F1

• E2F1 es un factor de transcripción que forma heterodímeros con proteínas DP para unirse a sitios de reconocimiento E2 (5'-TTTC[CG]CGC-3') en los promotores diana. Referencias relacionadas: PMID:10675335, PMID:12717439, PMID:17050006
• El complejo DRTF1/E2F regula la transición G1/S controlando la expresión de genes involucrados en la progresión del ciclo celular y la replicación del ADN. Referencias relacionadas: PMID:10675335, PMID:12717439, PMID:17704056
• E2F1 interactúa con la proteína del retinoblastoma RB1 de manera dependiente del ciclo celular, modulando su actividad transcripcional. Referencias relacionadas: PMID:10675335, PMID:12717439, PMID:17704056
• Actúa como un regulador dual, promoviendo tanto la proliferación celular como la apoptosis dependiente de TP53/p53. Referencias relacionadas: PMID:8170954
• Activa directamente la transcripción de PEG10 y RRP1B, y bloquea la diferenciación de adipocitos reprimiendo la unión de CEBPA a los promotores de sus genes diana. Referencias relacionadas: PMID:17050006, PMID:18625225, PMID:28992046, PMID:20040599, PMID:20176812
• Se localiza principalmente en el núcleo.
• Se modifica postraduccionalmente por fosforilación, acetilación, metilación y ubiquitinación, lo que regula su estabilidad y actividad.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El peso molecular predicho de E2F1 es de 47 kDa; para Western blotting, considere el uso de un porcentaje de gel apropiado y condiciones de bloqueo para este rango de tamaño.
• Para IF/ICC, la permeabilización nuclear efectiva es crítica; optimice los pasos de fijación y permeabilización para garantizar el acceso del anticuerpo al compartimento nuclear.
• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 200–301 de E2F1 humano; aunque se ha reportado reactividad cruzada con ratón y rata, valide la especificidad de detección en su especie y tejido diana.
• Este anticuerpo policlonal puede reconocer múltiples isoformas de E2F1; confirme los patrones de bandas utilizando los controles apropiados y, si es necesario, knockdown por siRNA.
• Para aplicaciones de ELISA, considere una titulación en tablero de ajedrez (checkerboard) para determinar las concentraciones óptimas de recubrimiento y del anticuerpo de detección.

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