Anticuerpo policlonal de conejo Anti-EARS2 para WB, ELISA - Q5JPH6

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de EARS2

• EARS2 codifica la glutamil-tRNA sintetasa mitocondrial no discriminante (mtGluRS), que aminoacila de forma exclusiva tanto el tRNAGlu como el tRNAGln con glutamato, un paso crítico para la traducción de proteínas mitocondriales. Referencias relacionadas: PMID:19805282
• La enzima funciona mediante un mecanismo dependiente de ATP en dos pasos: primero se activa el glutamato a Glu-AMP y luego se transfiere al extremo 3' de los tRNAs homólogos. Referencias relacionadas: PMID:19805282
• EARS2 pertenece a la familia de las aminoacil-tRNA sintetasas de clase I y contiene dominios conservados para la unión a ATP, la unión a ARN y la actividad ligasa.
• La proteína se localiza en la matriz mitocondrial, dirigida por un péptido de tránsito N-terminal.
• El empalme alternativo genera múltiples variantes de transcripción, que potencialmente regulan la función enzimática o la direccionamiento mitocondrial.
• Se ha identificado acetilación postraduccional que puede modular la actividad o la estabilidad.
• Las mutaciones en EARS2 se asocian a enfermedades mitocondriales primarias, incluida la deficiencia combinada de fosforilación oxidativa 12 (COXPD12).

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 42–220, que cubren una región conservada probablemente expuesta en condiciones nativas y desnaturalizadas, por lo que el anticuerpo es adecuado para WB y ELISA.
• Para Western blot, se recomienda cargar 20–30 µg de lisado enriquecido en mitocondrias o lisado total de células; se espera una banda cerca de los 59 kDa. Valide el resultado en su sistema de muestras, ya que las modificaciones postraduccionales pueden causar ligeros desplazamientos.
• El anticuerpo presenta reactividad cruzada con la EARS2 de ratón; al usar tejidos o células de ratón, verifique la especificidad con controles adecuados (por ejemplo, modelos de silenciamiento o eliminación del gen).
• Para ELISA, optimice el antígeno de recubrimiento (proteína recombinante o péptido) y la dilución del anticuerpo; se puede usar un formato de ELISA directo para evaluar el título del anticuerpo y la afinidad de unión.
• Almacene las alícuotas a -20 °C o -80 °C. Evite ciclos repetidos de congelación-descongelación para mantener la actividad.

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