Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-EDG2/LPA-1 (Receptor 1 del Ácido Lisofosfatídico) para WB y ELISA - Q92633

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de EDG2/LPA-1

• LPAR1 codifica un receptor acoplado a proteína G que se une al ácido lisofosfatídico (LPA), un mediador lipídico bioactivo involucrado en diversas respuestas celulares. Referencias relacionadas: PMID:19306925 PMID:25025571 PMID:26091040

• La señalización de LPA a través de LPAR1 activa múltiples proteínas G heterotriméricas (Gi/Go, G12/13, Gq), lo que conduce a la inhibición de la adenilil ciclasa, disminución de cAMP y aumento de los niveles de Ca²⁺ citoplasmático. Referencias relacionadas: PMID:26091040 PMID:19656035 PMID:19733258

• Los efectores descendentes incluyen la activación de fosfolipasa C mediada por RALA, cascadas de quinasas MAP y reorganización del citoesqueleto dependiente de Rho/RAC1, que promueve la formación de fibras de estrés de actina y lamelipodios. Referencias relacionadas: PMID:19306925 PMID:26091040

• LPAR1 desempeña un papel fundamental en la migración celular, la quimiotaxis y la cicatrización de heridas, con participación demostrada en la enfermedad pulmonar fibrótica y la motilidad de células madre. Referencias relacionadas: PMID:18066075 PMID:19656035 PMID:19733258

• El receptor también regula procesos del desarrollo, incluyendo el desarrollo normal del esqueleto y el cerebro, la diferenciación de osteoblastos y la neurogénesis adulta.

• Subcelularmente, LPAR1 se localiza en la membrana plasmática y endosomas, lo que concuerda con el tráfico dinámico del receptor.

• La proteína sufre glicosilación, formación de enlaces disulfuro y fosforilación, que modulan su señalización y expresión en membrana.

• LPAR1 se expresa de forma generalizada en tejidos adultos (cerebro, corazón, colon, próstata, ovario, etc.) pero muestra baja expresión en hígado, pulmón y leucocitos de sangre periférica. Referencias relacionadas: PMID:9070858

Guía experimental y consejos técnicos

• Dado el diseño del inmunógeno (péptido N-terminal, aa 1–100), se espera que el anticuerpo reconozca un epítopo en el extremo N-terminal extracelular de LPAR1; verifique la especificidad usando controles adecuados.
• Para Western blot, LPAR1 es una proteína de membrana de múltiples pasos con un peso molecular predicho de ~41 kDa; puede ser necesario incluir detergentes suaves en el buffer de lisis para solubilizar el receptor.
• En aplicaciones de ELISA, considere usar el péptido inmunógeno como control positivo para evaluar la unión del anticuerpo.
• Debido a la naturaleza de GPCR, modificaciones postraduccionales como la glicosilación pueden causar desplazamiento de las bandas; se puede usar un tratamiento de desglicosilación para confirmar la identidad del objetivo.
• Valide el rendimiento del anticuerpo en la especie adecuada (humana) y en la línea celular que expresa LPAR1; no se ha determinado la reactividad cruzada con otras especies.
• Se sabe que LPAR1 se internaliza después de la estimulación con LPA; para estudios de inmunofluorescencia o funcionales, pueden ser necesarias condiciones de estimulación adecuadas.

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