Anticuerpo monoclonal de conejo anti-EEA1 para WB y ELISA - Q15075

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización del antígeno 1 de endosomas tempranos

• El antígeno 1 de endosomas tempranos (EEA1), también conocido como proteína asociada a endosomas p162 o proteína 2 que contiene el dominio de dedo de zinc FYVE (ZFYVE2), es una proteína de membrana periférica implicada en el tráfico endosomal.
• EEA1 se une específicamente a vesículas fosfolipídicas enriquecidas en fosfatidilinositol 3-fosfato (PtdIns(3)P), facilitando la fusión y el tráfico de endosomas tempranos.
• La proteína contiene un dominio de dedo de zinc FYVE C-terminal que la dirige a las membranas de endosomas tempranos, junto con extensos dominios de bobina enrollada que median la dimerización y la interacción con otros reguladores endocíticos.
• Se localiza predominantemente en la cara citoplasmática de las membranas de endosomas tempranos, pero también se puede detectar en el citosol.
• Estudios funcionales demuestran que EEA1 participa en la unión y fusión endosomal dependiente de Rab5, proceso esencial para el progreso adecuado de la vía endocítica.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación, y características estructurales como los motivos de bobina enrollada y el motivo de unión a calmodulina IQ contribuyen a sus funciones reguladoras.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a la región N-terminal (aa 1-100) de EEA1 humano, que se encuentra altamente conservado en ratón y rata, lo que explica la reactividad cruzada observada.
• Para el análisis por Western blot, el peso molecular predicho es de aproximadamente 162 kDa; se recomienda utilizar un gel de SDS-PAGE al 6-8% y condiciones reductoras estándar.
• El proveedor ha validado este anticuerpo para WB y ELISA; para otras aplicaciones como inmunofluorescencia o inmunoprecipitación, se recomienda realizar una optimización previa.
• Dado que EEA1 está asociado a membranas, se sugiere incluir detergentes suaves en los tampones de lisis para mejorar la solubilidad y detección del antígeno.
• Valide la especificidad del anticuerpo en su especie objetivo (humano, ratón, rata) utilizando controles positivos y negativos adecuados.

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