Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-eEF2 (EF-2) para WB, ELISA - P13639

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de eEF2

• El factor de elongación 2 (eEF2) cataliza la translocación ribosomal dependiente de GTP durante la elongación de la traducción, moviendo el peptidil-tRNA del sitio A al P y el tRNA desacilado del sitio P al E (PubMed:26593721) Referencias relacionadas: PMID:26593721
• Esta translocación se acopla con el movimiento del ARNm y cambios conformacionales en el ribosoma para impulsar la transición del estado pre- al post-translocacional (PubMed:26593721) Referencias relacionadas: PMID:26593721
• eEF2 pertenece a la superfamilia de GTPasas del factor de traducción de clase TRAFAC, que contiene dominios de unión e hidrólisis de GTP esenciales para su función
• Se localiza predominantemente en el citoplasma, pero también puede encontrarse en el núcleo
• Experimenta extensas modificaciones postraduccionales, incluyendo acetilación, ADP-ribosilación, metilación, fosforilación y ubiquitinación, que pueden regular su actividad
• Las mutaciones en EEF2 se asocian con la ataxia espinocerebelosa tipo 26 (SCA26), un trastorno neurodegenerativo
• La proteína tiene un peso molecular calculado de ~95.3 kDa, consistente con la migración observada de ~95 kDa en SDS-PAGE

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aminoácidos 1–290) de eEF2 humano, lo que puede permitir la detección de formas de longitud completa y algunas formas truncadas
• Para western blot, la banda predicha es de ~95 kDa; validar con controles positivos y negativos apropiados
• Debido al papel esencial de eEF2 en la traducción, los niveles de expresión pueden variar con las condiciones de crecimiento celular; considerar el uso de controles de carga como β-actina o GAPDH
• ELISA puede usarse para detección cuantitativa; determinar la dilución óptima del anticuerpo y el rango lineal del ensayo empíricamente
• Para inmunofluorescencia o IHC, tener en cuenta que eEF2 es principalmente citoplasmático pero también puede exhibir tinción nuclear; usar protocolos de fijación y permeabilización apropiados

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