Anticuerpo policlonal de conejo anti-eEF2 para WB y ELISA - P13639

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de eEF2

• eEF2 (Factor de elongación 2) es una GTPasa clave que impulsa la translocación ribosomal durante la elongación de la síntesis de proteínas. Referencias relacionadas: PMID:26593721
• Cataliza el movimiento coordinado de las moléculas de ARNt y ARNm a través del ribosoma, realizando la transición de estados pre-translocacionales a post-translocacionales.
• eEF2 está codificado por el gen EEF2, y las mutaciones están relacionadas con la ataxia espinocerebelosa 26 (SCA26), un trastorno neurodegenerativo.
• La proteína es predominantemente citoplasmática, pero también puede localizarse en el núcleo, lo que sugiere posibles funciones extra-ribosomales.
• Las modificaciones post-traduccionales incluyen fosforilación, acetilación, ADP-ribosilación, metilación y ubiquitinación, las cuales regulan su actividad.
• Es un miembro de la familia de factores de elongación de unión a GTP y un componente esencial de la maquinaria de biosíntesis de proteínas.
• Su peso molecular es de aproximadamente 95 kDa (95,338 Da previstos a partir de la secuencia).

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aa 1–290) de eEF2 humano; considere esta región para el mapeo de epítopos o en ensayos competitivos.
• Para Western blot, utilice lisados de células completas o de tejido; eEF2 es abundante, por lo que una carga estándar (p. ej., 20–30 µg) puede ser suficiente. Optimice el bloqueo y la dilución del anticuerpo para su sistema.
• En ELISA, recubra con eEF2 recombinante o péptido y realice una titulación en tablero de ajedrez para determinar las concentraciones óptimas de recubrimiento y de anticuerpo.
• Valide la reactividad cruzada con muestras humanas; la reactividad con otras especies no ha sido probada, por lo que debe verificar empíricamente si utiliza muestras no humanas.
• Debido a que eEF2 está sujeto a múltiples modificaciones post-traduccionales, pueden aparecer desplazamientos de banda o bandas múltiples bajo ciertas condiciones; se pueden utilizar desfosforilación o inhibidores específicos para identificar formas modificadas.

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