Anticuerpo policlonal de conejo Anti-EFNA1 para WB, IHC-P, ELISA - P20827

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de EFNA1

• EFNA1 codifica la efrina-A1, un ligando de superficie celular anclado por glicosilfosfatidilinositol (GPI) de la familia de las tirosina quinasas receptoras Eph. También se conoce como LERK-1, B61 y proteína 4 inducida por el TNF alfa.
• La efrina-A1 se une de forma promiscua a los receptores Eph de células adyacentes, mediando la señalización bidireccional dependiente de contacto que regula la migración celular, la repulsión y la adhesión durante el desarrollo neuronal, vascular y epitelial. Referencias relacionadas: PMID:17332925 PMID:18794797
• En biología vascular, la efrina-A1 desempeña un papel fundamental en la angiogénesis al activar EPHA2 para promover la diferenciación y migración de células endoteliales.
• Como ligando de EPHA3, la efrina-A1 inhibe la transición epitelial-mesenquimal en las células cardíacas, contribuyendo al desarrollo correcto del corazón. Referencias relacionadas: PMID:12794130
• La efrina-A1 también puede participar en la morfogénesis de las espinas dendríticas (por similitud).
• La proteína se localiza predominantemente en la membrana celular mediante un anclaje GPI, pero puede liberarse en forma soluble por escisión. Se expresa abundantemente en el cerebro y su expresión suele estar disminuida en el glioma primario. Se ha detectado efrina-A1 monomérica soluble en el glioblastoma y en células de cáncer de mama.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la formación de enlaces disulfuro y glicosilación N-ligada. La proteína sufre empalme alternativo, generando isoformas unidas a membrana y secretadas.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 19-182 de la EFNA1 humana, que cubren el dominio extracelular de unión al receptor. El anticuerpo policlonal resultante puede reconocer tanto las isoformas completas ancladas por GPI como las isoformas solubles.
• Para Western blot, los usuarios pueden probar diluciones de anticuerpo en el rango comúnmente utilizado para anticuerpos policlonales (por ejemplo, 1:500–1:2000) y confirmar la especificidad usando lisados de líneas celulares con sobreexpresión y eliminación de EFNA1. La EFNA1 endógena migra aproximadamente a 24 kDa.
• Para IHC-P, considere optimizar la recuperación de antígeno e incluya controles de tejido adecuados. Se pueden usar secciones de tejido parafinado de humano y de ratón, dada la reactividad cruzada declarada.
• En ELISA, el anticuerpo se puede emplear como reactivo de captura o detección; la concentración de trabajo óptima debe determinarse experimentalmente en el formato de ensayo específico.
• Debido a la naturaleza anclada por GPI y la posible eliminación de la efrina-A1, la detectabilidad puede variar entre tipos celulares y condiciones de tratamiento; se recomienda la validación en el sistema de muestra correspondiente.

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