Anticuerpo policlonal de conejo Anti-EGFR [Validado por KD] para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P00533

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de EGFR

• El receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR), también denominado protooncógeno c-ErbB-1 y receptor tirosina quinasa erbB-1, está codificado por el gen EGFR (nombres alternativos: ERBB, ERBB1, HER1).
• Funciona como una receptor tirosina quinasa que se une a ligandos de la familia EGF (EGF, TGFA, AREG, EPGN, BTC, EREG, HBEGF) para inducir la dimerización y autofosforilación del receptor, activando así las principales vías downstream que incluyen RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC, STAT y potencialmente NF-κB (PubMed:10805725, PubMed:27153536, PubMed:2790960, PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029, PubMed:11116146). Referencias relacionadas: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960 PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029 PMID:11116146
• Fosforila directamente a efectores downstream como RGS16 (mejorando su actividad GTPasa y vinculándolo a la señalización de GPCR) y MUC1 (promoviendo las interacciones entre SRC y CTNNB1), y regula positivamente la migración celular mediante la interacción con CCDC88A/GIV (PubMed:11602604, PubMed:11483589, PubMed:20462955). Referencias relacionadas: PMID:11602604 PMID:11483589 PMID:20462955
• Una isoforma de splicing alternativo (isoforma 2) puede funcionar como antagonista de la señalización mediada por EGF.
• La localización subcelular incluye la membrana celular, retículo endoplásmico, aparato de Golgi, núcleo, endosomas y formas secretadas, lo que refleja su tráfico dinámico y sus funciones de señalización.
• Se expresa de forma ubicua en tejidos humanos, y la isoforma 2 se detecta notablemente en cánceres de ovario.
• Clasificado como protooncógeno, tirosina quinasa y glicoproteína transmembranal; también actúa como receptor celular huésped para la entrada del virus de la hepatitis C (VHC), facilitando la internalización viral.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación, glicosilación, hidroxilación, metilación, palmitoilación y conjugación similar a ubiquitina, según se indica en las palabras clave de UniProt.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aa 1021–1210) se encuentra dentro del dominio C-terminal intracelular; por lo tanto, el anticuerpo puede detectar tanto fragmentos de longitud completa como fragmentos del C-terminal. Verifique la especificidad en lisados celulares o muestras de tejido relevantes.
• Para Western blotting, se espera una banda alrededor de 134 kDa; sin embargo, la glicosilación y fosforilación pueden causar cambios en la movilidad. Incluya marcadores de peso molecular y valide con controles positivos y negativos para EGFR.
• Para IHC-P, los protocolos estándar de recuperación de antígeno (por ejemplo, tampón de citrato pH 6,0) y bloqueo deben optimizarse; pruebe con tejidos conocidos positivos (por ejemplo, piel, placenta) y negativos (por ejemplo, knockout).
• En IF/ICC, los métodos de fijación (PFA vs metanol) afectan la tinción de membrana de EGFR; se recomienda la detección paralela con un marcador de membrana.
• Para ELISA, el anticuerpo se puede usar como reactivo de captura o detección; las condiciones del ensayo (concentración de recubrimiento, bloqueo) requieren optimización individual.
• Se informa reactividad cruzada para muestras humanas; si se usa en otras especies, verifique la reactividad de forma independiente debido a posibles variaciones de secuencia.

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