Anticuerpo policlonal de conejo anti-eIF2A para WB, ELISA - Q9BY44

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: función y localización de eIF2A

• eIF2A (factor de iniciación de la traducción eucariota 2A), también denominado factor de iniciación de la traducción eucariota de 65 kDa 2A, está codificado por el gen EIF2A en humanos. Tiene un peso molecular de aproximadamente 65 kDa (UniProt: 64990 Da).
• eIF2A participa en las primeras etapas de la síntesis de proteínas para un subconjunto específico de ARNm. Dirige la unión del metionil-tRNAi a las subunidades ribosómicas 40S de manera dependiente del codón, a diferencia del complejo eIF-2 canónico, que opera mediante una unión dependiente de GTP.
• La proteína se expresa ampliamente en los tejidos, con niveles de expresión más altos observados en el páncreas, el corazón, el cerebro y la placenta, lo que indica posibles funciones específicas de cada tejido en la regulación de la traducción.
• Entre sus características estructurales se incluyen repeticiones WD, que facilitan las interacciones proteína-proteína, y un dominio de hélice superenrollada. eIF2A experimenta corte y empalme alternativo y modificaciones postraduccionales, como acetilación y fosforilación.
• Está clasificada dentro de los factores de iniciación y participa en la regulación de la traducción. La identificación mediante proteómica ha confirmado su presencia en proteomas de referencia.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético derivado de la región N-terminal (aminoácidos 1–100) de eIF2A humano. Esta región está relativamente conservada; verifique la identidad de la secuencia entre especies si se prevé reactividad cruzada con otros ortólogos.
• Para el análisis mediante Western blot, considere probar diluciones iniciales del anticuerpo de 1:500 a 1:2000 y valide la especificidad de la banda utilizando lisados celulares con reducción o eliminación de eIF2A. El eIF2A endógeno migra aproximadamente a 65 kDa; asegúrese de que los marcadores de peso molecular sean adecuados.
• En aplicaciones de ELISA, optimice las concentraciones del antígeno de recubrimiento y del anticuerpo. Incluya controles adecuados para tener en cuenta la unión de fondo derivada de la naturaleza policlonal del anticuerpo.
• Dada la amplia expresión tisular de eIF2A, seleccione lisados de control positivo de tejidos con mayor expresión (por ejemplo, páncreas y cerebro) para los experimentos iniciales.

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